目的:研究Mel受体激动剂Neu-P11能否改善高糖高胰岛素诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗,并研究Neu-P11和Mel对高糖高胰岛素诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的改善机制。方法:1.3T3-L1细胞的培养与分化:用IBMX、地塞米松和胰岛素三联培养诱导3T3-L1成纤维细胞分化为脂肪细胞,并用油红O染色鉴定细胞的分化情况和脂肪细胞形态。2.诱导脂肪细胞胰岛素抵抗:高糖高胰岛素作用脂肪细胞24时后,酶法测定细胞中甘油三酯沉积量,葡萄糖氧化酶法测定培养基中的糖含量,计算糖消耗量,验证胰岛素抵抗模型的建立。3.检测Mel及其受体激动剂Neu-P11对胰岛素抵抗脂肪细胞的葡萄糖消耗能力、胰岛素敏感性、TG沉积量及其相关蛋白表达的影响。采用酶法测定细胞中甘油三酯沉积量,葡萄糖氧化酶法测定培养基中的糖含量,计算糖消耗量;采用Western-blot分别检测APN、Leptin、AdipoR1、AMPK(磷酸化)和ACC(磷酸化)的表达。结果: 1.分化10～12天后,3T3-L1成纤维细胞分化为成熟的脂肪细胞,细胞由梭形变为圆形,细胞内有透亮的脂滴呈环状排列。2.高糖高胰岛素作用脂肪细胞24时后,甘油三酯沉积量显著升高,糖消耗量较正常对照细胞显著降低,对胰岛素的敏感性也相应降低。3.胰岛素抵抗细胞经Mel和Neu-P11处理后,糖消耗量和胰岛素敏感性较未处理组显著升高;TG含量显著降低;APN表达量显著升高;瘦素和AdipoR1的表达量及AMPK和ACC的磷酸化水平无显著变化。结论: 1.高糖高胰岛素可以诱导脂肪细胞产生胰岛素抵抗;2.Neu-P11可增加胰岛素抵抗脂肪细胞的糖消耗量、胰岛素敏感性和脂联素的表达,减少TG的沉积;3. Neu-P11和Mel对瘦素、ADR1的表达量和AMPK、ACC的磷酸化水平均无显著影响,推测它们对胰岛素抵抗脂肪细胞糖脂代谢紊乱的改善作用可能是通过其他信号通路实现的。