山西戎子酒庄酵母菌的分离鉴定及优良酿酒酵母菌株筛选

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tangtieming1983
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葡萄酒的酿造是一个复杂的微生物转化过程,酵母菌作为葡萄酒生产中酒精发酵的主导微生物,对葡萄酒的感官质量具有重要影响。本研究利用WLN营养培养基(Wallerstein Laboratory Nutrient Agar)聚类分析和26S rDNA D1/D2区序列分析方法,对2011年山西戎子酒庄五个主栽品种(霞多丽、梅鹿辄、赤霞珠、玛瑟兰、品丽珠)的自然发酵过程中分离出的1280株葡萄酒相关酵母菌株进行分类鉴定,调查了该酒厂野生酵母菌的种类及分布情况,进而利用Interdelta指纹分析技术进行酿酒酵母菌株的基因型分型,并在各个基因型中分别选取2-3株菌对其基本生理特性(耐受性、絮凝性、自溶性、嗜杀性)进行系统研究,进而为筛选出优良的酿酒酵母菌株做基础。主要的研究结果如下:1.鉴定结果表明所有供试菌株分属于7属8种,它们是酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、葡萄汁有孢汉生酵母Hanseniaspora uvarum、罕见有孢汉逊酵母Hanseniaspora occidentalis、克鲁维毕赤酵母Pichia kluyveri、美极梅奇酵母Metschnikowiapulcherrima、假丝酵母Candida zemplinina、陆生伊萨酵母Issatchenkia 和普鲁兰酵母Aureobasidiumpullulans,分别占分离总数的比例38.36%、48.98%、0.86%、2.58%、1.72%、3.13%、2.81%、1.56%。2.用山西戎子酒庄所使用的工业酿酒酵母RC212、BM45、CY3079做对照,对山西乡宁地区玛瑟兰自然发酵中分离出的92株酿酒酵母单菌落进行了 Interdelta指纹图谱分析,共获得6种基因型。其中基因型Ⅰ-Ⅵ分别占总比例的21.74%、1.09%、1.09%、42.38%、4.35%、29.35%。3.基因型分型后选取的11株供试菌株的絮凝性均在中等以上;且所有菌株均具有良好的自溶能力;供试菌株在SO2浓度为500mg/L的YEPD培养基,均能正常生长;酒精浓度在 14%能生长的菌株有RMaa-3-16、RMab-2-25、RMaa-3-14、RMab-2-30、RMaa-3-11、RMaa-3-29、RMaa-3-34、RMab-3-38、RMab-3-40。菌株RMab-2-25、RMab-2-30、RMaa-3-11、RMaa-3-34具有明显嗜杀性;有嗜杀性但不明显的菌株有RMaa-3-16、RMaa-3-14、RMaa-3-31、RMaa-3-32、RMab-3-40。4.从自溶和絮凝两个生理特性来看,经Interdelta指纹图谱分型的菌株各基因型在组内的生理特性方面的并没有显著差异性,其表现型较为一致。其中基因型Ⅱ(RMaa-3-11)的絮凝、自溶两个生理特性指标与其他基因型在组间有极显著性差异,基因型Ⅰ和其他基因型菌株相比,自溶性方面差异性较为显著,而在絮凝性方面并无明显优势。从耐受性和嗜杀特性来看,同组基因型和其表现型并没有很好的一致性。5.针对各生理指标的测定结果显示:菌株RMab-2-25和RMab-2-30(基因型Ⅰ)、RMaa-3-11(基因型Ⅱ)、RMaa-3-34(基因型V),在耐受、絮凝、自溶、嗜杀四个特性的综合指数中优于其他供试菌株和三株商业酵母。菌株RMaa-3-16、RMab-2-25、RMab-2-30、RMaa-3-11、RMaa-3-14、RMaa-3-31、RMaa-3-32、RMaa-3-34、RMab-3-40、RMab-3-40的四个特性综合指数和三株商业酵母相当。
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