【摘 要】
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目的评定苁归益肾胶囊干预早期糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease,DKD）患者的临床疗效。并观察其对DKD大鼠TGF-β1、MEK、p-MEK、ERK、p-ERK蛋白表达的影响,分析苁归益肾胶囊作用于DKD的可能机理。方法1.临床研究80例早期糖尿病肾脏疾病证型为肾虚血瘀证的患者,随机分成两组（均为40例）,均予以基础治疗。对照组予厄贝沙坦片口服,150mg/次,qd,治
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目的评定苁归益肾胶囊干预早期糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease,DKD）患者的临床疗效。并观察其对DKD大鼠TGF-β1、MEK、p-MEK、ERK、p-ERK蛋白表达的影响,分析苁归益肾胶囊作用于DKD的可能机理。方法1.临床研究80例早期糖尿病肾脏疾病证型为肾虚血瘀证的患者,随机分成两组（均为40例）,均予以基础治疗。对照组予厄贝沙坦片口服,150mg/次,qd,治疗组在对照组基础上予苁归益肾胶囊,5粒/次,0.4g/粒,tid。试验周期为12周,记录并比较治疗前后中医证候积分,空腹血糖（FPG）、餐后两小时血糖（2h PG）、糖化血红蛋白（Hb A1c）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、尿微量白蛋白/尿肌酐（ACR）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）的改变情况,进行临床疗效评定。2.实验研究90只SPF级雄性SD大鼠予普通饲料适应性喂养1周后,随机选取10只为空白组（普通饲料喂养）,另外80只为造模组（高糖高脂饲料喂养）,4周后,造模组大鼠腹腔注射1%链脲佐菌素（35mg/kg）,诱导DKD大鼠模型。总计成功造模65只,随机分为5组（各13只）,模型组、厄贝沙坦组、苁归益肾胶囊高、中、低剂量组,每天分别予生理盐水5ml/kg、厄贝沙坦15mg/kg、苁归益肾胶囊1080mg/kg、540mg/kg、270mg/kg灌胃,空白组灌胃同模型组,药物干预周期为12周。记录实验前后各组大鼠一般情况、体重、FPG,比较BUN、Scr、24h UP、IL-6、TNF-α水平,肾脏病理变化及TGF-β1、MEK、p-MEK、ERK、p-ERK蛋白的表达情况。结果1.临床观察结果治疗前两组基线资料无统计学差异（P＞0.05）。治疗12周后,治疗组有效率（83.3%）高于对照组（68.6%）（P＜0.05）。两组病例的中医证候积分、FPG、2h PG、Hb A1c、BUN、Scr、ACR、IL-6、TNF-α及TGF-β1与治疗前相比降低（P＜0.05）。治疗组中医证候积分、FPG、2h PG、BUN、Scr、ACR、IL-6、TNF-α、TGF-β1水平较对照组降低（P＜0.05）,Hb A1c水平较对照组升高（P＞0.05）。2.动物实验结果2.1体重:给药12周后,与空白组相比,模型组、厄贝沙坦组及苁归益肾胶囊各剂量组大鼠体重降低（P＜0.05）,各药物干预组大鼠体重较模型组上升（P＜0.05）。2.2血糖:药物干预12周后,模型组、厄贝沙坦组与苁归益肾胶囊各剂量组血糖均比空白组高（P＜0.05）;厄贝沙坦组及苁归益肾低剂量组血糖较模型组降低（P＞0.05）,苁归益肾胶囊高、中剂量组血糖较模型组降低（P＜0.05）。2.3 BUN、Scr、24h UP:药物干预12周后,与空白组相比,模型组、厄贝沙坦组与苁归益肾胶囊各组BUN、Scr、24h UP上升（P＜0.05）;与模型组相比,厄贝沙坦组、苁归益肾胶囊各组BUN、Scr、24h UP下降（P＜0.05）。2.4 IL-6、TNF-α:模型组、厄贝沙坦组及苁归益肾胶囊各剂量组较空白组相比IL-6和TNF-α均上升（P＜0.05）;与模型组相比,厄贝沙坦组及苁归益肾胶囊各剂量组IL-6、TNF-α降低（P＜0.05）。2.5 HE染色及Masson染色结果:HE染色:相较于空白组,模型组与各药物干预组肾脏组织均有病理改变,各药物干预组肾脏病理改变较模型组有不同程度的改善。Masson染色:模型组与各药物干预组肾脏胶原纤维增生情况较空白组严重,经药物干预的各组肾脏组织胶原纤维沉积情况比模型组轻。2.6 Western blot结果:模型组及各药物干预组TGF-β1表达量,MEK、ERK磷酸化水平较空白组明显升高（P＜0.05）,与模型组比,厄贝沙坦组及苁归益肾胶囊（高、中）剂量组TGF-β1表达量,MEK、ERK磷酸化水平降低（P＜0.05）,低剂量组TGF-β1表达量,MEK、ERK磷酸化水平降低（P＞0.05）。结论:苁归益肾胶囊干预早期糖尿病肾脏疾病临床疗效显著,能延缓DKD大鼠肾脏纤维化进程,可能是通过下调TGF-β1蛋白表达,抑制MEK/ERK信号通路的活化实现的。
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