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据大量研究发现,低聚糖因其具有抗肿瘤、提高免疫功能、抗氧化、抗衰老、降血脂、降血糖、治疗便和防止腹泻秘等多种生物活性,被广泛应用于医药、食品及农业等领域。鉴于此,本实验精选河南怀地黄为研究对象,以50%乙醇水溶液为提取剂,利用填料为硅藻土-活性炭的层析柱对地黄低聚糖进行纯化,利用HPLC对地黄低聚糖的组成、含量进行了分析并对其生物活性做了进一步研究。本实验的主要结论如下：1地黄经粉碎、脱脂,然后利用50%乙醇水溶液进行提取,随后经过醇沉、脱蛋白等制得地黄低聚糖的粗品。经高效液相色谱分析确定了利用柱层析法获得地黄低聚糖(RGOs)的最佳纯化条件：首先用6%的乙醇水溶液作为洗脱剂除掉单糖,然后利用60%乙醇水溶液作为洗脱剂洗脱制得RGOs,且RGOs的提取率为31.3%。2RGOs的HPLC-RI分析结果显示：RGOs组成成分主要为蔗糖,棉子糖及水苏糖,其百分比含量分别为7.1%,23.7%和61.7%,分析结果显示RGOs是一种典型的棉子糖族寡糖。3连续21天灌胃小鼠RGOs,通过测定反映肝脏功能及活性的各个指标发现RGOs可以明显降低四氯化碳导致的小鼠极性肝损伤,分析结果显示给予RGOs的各组小鼠血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量与模型组相比分别有了一定程度的减少；肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和谷胱甘肽(GSH)含量与模型组相比也有了不同程度的升高；与此同时,给予RGOs的各组均可以降低四氯化碳导致的小鼠肝脏匀浆中丙二醛(MDA)的含量升高的现象。由此可见RGOs对小鼠肝损伤具有保护作用,并且随着给予RGOs的剂量的增加保护作用增强,这也与肝脏的病理组织学分析结果一致。4小鼠长期(10周)饮用含有3%的左旋肉碱的水后,通过生化分析发现左旋肉碱可导致的小鼠血脂水平上升,血管细胞出现炎症,血管内皮细胞受到损伤。然而,通过灌胃一定剂量的RGOs的各组可使小鼠血清中高密度脂蛋白(HDL)、一氧化氮(NO)和6-酮前列腺素Fla (6-keto-PGFla)的含量水平与单独饮用左旋肉碱组相比都有所提高,而低密度脂蛋白(LDL)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、内皮素-1(ET-1)、C-反应蛋白(CRP)、血栓素B2(TXB2)含量与左旋肉碱组相比都有了不同程度的降低。通过测定左旋肉碱组小鼠肝脏组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和一氧化氮(NO)的活性水平及含量较正常饲养组均有所降低,而丙二醛(MDA)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量及活性水平均有升高,可进一步揭示了利用左旋肉碱导致的小鼠血管内皮损伤模型是成功的。然而,通过灌胃一定剂量的RGOs,均可以改善左旋肉碱对上述指标的影响,且随着RGOs剂量的增加改善效果越明显。小鼠肝脏组织油红染色和H&E染色病理学观察和分析,也表明了左旋肉碱可以进一步致使小鼠肝脏内有脂肪堆积,部分肝细胞核萎缩,少量的肝细胞坏死,而随着给药(RGOs)组随着剂量的增加也有了明显的改善。