人脑表达的新基因GRY-RBP、LDB1和BL1全长cDNA克隆及其鉴定

来源 :中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:popularmp3007008
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神经发育是刘经科学研究的重要课题.分子生物学方法的引入加深了对神经发育的认识.但是目前对神经发育的了解主要是来源于某些模式生物,对人神经发育的分子机制了解尚处于初始阶段.由于这个原因,克隆和鉴定人脑表达基因已经逐渐成为一个研究热点.为了分离和克隆新的与神经发育相关的基因,该研究在实验室已经分离的EST基础上综合分析数据库信息,特别是模式生物神经发育基因的同源信息及其突变表型,选取了部分EST作为筛选全长cDNA的探针.为了提高筛选cDNA文库的效率,为规模化分离新基因创造条件,研究小组首先构建了含3×10<6>独立克隆的点阵排列的胎儿脑cDNA文库.设计特异于EST的引物,采取PCR和杂交结合的方法筛选点阵cDNA文库.该方法具有具有快速、高效、特异、成本低的优点.应用该方法通过筛选脑cDNA文库,得到了数个全长cDNA序列,并通过Northern了解了它们在不同组织中的表达.该文介绍了其中的三条全长cDNA,GRY-RBP、LBD1和BL1.另外,对其中的GRY-RBP编码的蛋白进行了的表达、纯化、并通过鉴定它的RNA结合活性对其功能进行了初步研究.
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