目的：建立高效液相色谱-质谱检测兔血浆乌头碱、次乌头碱和新乌头碱的方法，研究兔急性草乌中毒血液灌流后的毒代动力学。 方法：①兔血浆乌头碱、次乌头碱和新乌头碱检测方法的建立。高效液相色谱仪为Agilent1200系列，质谱仪为Bruker esquire HCT系列。色谱柱为ZORBAX SB-C18柱，流动相为乙腈-0．1％碳酸氢铵（60：40），流速为0．6mL/min，柱温：30℃。兔血浆在碱性条件下经乙醚萃取后进样分析。电喷雾离子化源（ESI），正离子方式检测，扫描方式为选择离子监测（SIM）；用于定量分析的离子反应分别为m/z366（小檗碱），m/z632（新乌头碱），m/z646（乌头碱），m/z616（次乌头碱）。内标法峰面积定量。②兔急性草乌中毒血液灌流后的的毒代动力学研究。普通级健康成年雄性日本大耳白兔24只，体重（2．5±0．2）kg，随机分为3组，每组8只。急性草乌中毒组（A组）：予草乌酒1．0mL/kg灌胃（ig）染毒建立兔急性草乌中毒模型；血液灌流治疗组（B组）：予草乌酒1．0mL/kg ig染毒，染毒后1h予血液灌流2h；毒代动力学组（C组）：予草乌酒1．0mL/kg ig染毒，染毒后0．25h予血液灌流2h。急性草乌中毒组及血液灌流治疗组分别于染毒后0．5h、1h、2h、3h、6h取血；毒代动力学组分别分别于染毒后0．5h、1h、1．5h、2h、3h、4h、6h、12h、24h取血浆。以方法①建立的高效液相色谱-质谱法检测血浆新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的浓度。③计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，应用DAS2．0程序计算毒代动力学参数，应用SPSS12．0进行t检验、方差分析等处理，P<0．05为差异有显著性意义。 结果：①在此HPLC-MS条件下，新乌头碱、乌头碱、次乌头碱峰形良好，无血浆内源性物质干扰。新乌头碱、乌头碱、次乌头碱三种物质的线性范围宽，线性关系良好，定量下限分别为1．0 ng/mL、0．4 ng/mL和0．5ng/mL；血浆的萃取回收率高，三种物质的日内、日间RSD均小于10％。三种物质在血浆样品中具有良好的稳定性。②急性草乌中毒兔血浆新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量在染毒后0．5 h时即可测到，此后逐渐升高，约4-6 h到达高峰，染毒12h后兔血浆新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量极低。血液灌流治疗兔血浆新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量在染毒后0．5h、1h时与中毒组相比无明显差异（P>0．05），2h、3h、6h血浆新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量比中毒组明显降低（P<0．05）。急性草乌中毒血液灌流后，新乌头碱毒代动力学参数为：Tmax（3．13±0．83）h、Cmax（11．50±2．14）ng/mL、Ka（1．63±0．89）h、Ke（0．13±0．05）h、t1/2（5．86±1．66）h、V/F（85．42±20．90）L/kg、CL/F（10．28±1．46）L/h/kg；乌头碱毒代动力学参数为：Tmax（3．25±0．46）h、Cmax（18．74±5．50）ng/mL、Ka（1．22±0．42）h、Ke（0．10±0．03）h、t1/2（7．53±2．36）h、V/F（2．68±1．05）L/kg、CL/F（0．25±0．08）L/h/kg；次乌头碱毒代动力学参数为：Tmax（3．00±0．76）h、Cmax（14．61±10．97）ng/mL、Ka（1．45±1．16）h、Ke（0．09±0．03）h、t1/2（8．30±2．12）h、V/F（10．74±6．87）L/kg、CL/F（0．85±0．38）L/h/kg。 结论： ①本实验建立的HPLC-MS同时检测兔血浆新乌头碱、乌头碱、次乌头碱方法准确、灵敏、简便，测得数据可靠。适用于草乌的浓度监控、药动学和毒动学研究。 ②急性草乌中毒兔血液灌流治疗后血浆中草乌成分浓度明显降低。 ③急性草乌中毒兔血液灌流治疗后的毒代动力学呈一级吸收的一室模型。