牛的初乳中含有极为丰富的生物活性物质,是提取和利用生物活性物质的最适来源之一.其中乳铁蛋白的含量约为1mg/ml,比常乳高近50倍.乳铁蛋白作为其中一种具有生物活性的糖蛋白,不仅具有广谱的抗菌性质,而且还能够增强机体的抗病毒、抗癌能力和免疫能力,防治感染性疾病.因此,从来源丰富的牛初乳中提取出乳铁蛋白,把它作为功能性成分应用于食品等行业,具有广阔的应用和开发前景,目前关于乳铁蛋白生物作用的许多研究正在进行中.本研究通过硫酸铵沉淀、乙醇沉淀和葡聚糖凝胶层析等方法,从牛初乳中分离纯化出不同纯度的乳铁蛋白,通过酶联免疫法(ELISA)检测不同分离纯化方法所获得的乳铁蛋白的含量,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了其纯度.结果表明,通过:两次硫酸铵沉淀→乙醇沉淀分离得到纯度为45﹪的乳铁蛋白;通过:两次硫酸铵沉淀→两次Sephadex G-100柱层析(两次层析沈脱液分别为蒸馏水和磷酸盐缓冲液)分离得到纯度为92﹪的乳铁蛋白;通过:两次硫酸铵沉淀→两次Sephadex G-100柱层析(两次层析洗脱液分别为蒸馏水和磷酸盐缓冲液)→非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离提取到纯度为100﹪的乳铁蛋白.三种方法分离得到的乳铁蛋白通过凝胶成像系统分析得知其分子量均为81,000Da.此外,还对分离得到的乳铁蛋白样品的抗菌活性进行了初步的研究.