细胞自噬和细胞凋亡在邻苯二甲酸二丁酯对生殖结节发育影响中相关作用机制的研究

来源 :苏州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:anyok1979
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
第一部分DBP对SD大鼠生殖结节的发育及雄激素水平的影响目的:邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)是工农业及生活用品上的常用塑化剂,可对环境造成污染。本实验研究妊娠期暴露DBP对雄性子代生殖系统,尿道下裂发生率及雄激素水平的影响。方法:将SD大鼠孕鼠随机分为正常对照组和DBP组。怀孕13-19天,用灌胃法对DBP组孕鼠给予每天750毫克/千克体重溶于每只2ml玉米油的DBP,对照组给予相应量的玉米油作安慰剂。孕第19天,用4%水合氯醛将孕鼠麻醉后,剖宫取出胎鼠,判断性别并计数,称量体重,测量生殖结节到肛门距离(anogenital distance,AGD),生殖结节的长度及直径。对胎鼠生殖结节组织切片进行HE染色,光镜观察组织结构。将胎鼠断头取血,离心,取血清,用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)监测血清睾酮水平。结果:DBP组子代雄性胎鼠和雌性胎鼠的比例较正常对照组无明显差异,但DBP组每窝活胎鼠个数的均数明显低于正常对照组,有明显统计学差异。DBP组子代胎鼠与正常对照组相比,AGD明显缩短,AGD/体重比例、生殖结节体积及生殖结节体积/体重比例明显减小(p<0.05)。DBP组雄性胎鼠尿道下裂发生率为43.64%,正常对照组未见尿道下裂。DBP组雄性胎鼠血清睾酮水平较正常对照组明显降低,具有明显统计学差异(p<0.05)。结论:孕期暴露DBP能诱导子代胎鼠尿道下裂的发生,能明显抑制雄性子代胎鼠血清睾酮的合成,对雄性子代胎鼠生殖结节的发育具有明显影响。第二部分DBP对雄性SD大鼠胚胎期生殖结节自噬及凋亡的影响及机制目的:研究孕期暴露DBP对雄性子代SD大鼠生殖结节细胞自噬和细胞凋亡的影响,进一步探讨孕期暴露DBP对雄性子代SD大鼠生殖结节细胞自噬相关通路的调控。方法:尿道下裂实验动物模型的建立同第一部分。孕第19天,取DBP组中的尿道下裂胎鼠及正常对照组中胎鼠的生殖结节,制作冰冻切片,用TUNEL染色法检测生殖结节细胞的凋亡情况;取子代雄性尿道下裂及正常对照组中胎鼠的生殖结节制作超薄切片,用透射电镜法观察生殖结节细胞中自噬结构的改变;取尿道下裂及正常对照组胎鼠的生殖结节,提取总蛋白,用免疫印迹法检测生殖结节组织中的自噬标记蛋白(LC3,P62)以及自噬通路关键蛋白(Akt,p-Akt,p-m TOR,p-S6,Beclin-1)。结果:与正常对照组比较,尿道下裂组生殖结节中TUNEL染色阳性细胞数明显增多;自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I的比例显著增高;p62蛋白表达明显减少,均具有明显统计学差异(p<0.05),而两组Beclin-1的表达无统计学差异。通过透射电镜在尿道下裂胎鼠生殖结节中发现大量自噬小体及自噬溶媒体,而正常对照组中相对少见。尿道下裂组p-Akt,p-m TOR,p-S6蛋白明显较正常对照组减少,而Akt的蛋白表达在两组中无明显差异(p<0.05)。结论:孕期DBP的暴露能够抑制子代雄性胎鼠生殖结节细胞凋亡,促进子代雄性生殖结节组织的细胞自噬。孕期暴露DBP对子代雄性胎鼠生殖结节细胞自噬的激活可能是通过抑制PI3K/Akt/m TOR通路的活性来实现。
其他文献
美国商务部下属的国家标准与技术研究所于2014年发布了《网络安全框架(1.0版)》,后升级至1.1版。框架的提出是为了增强关键基础设施的网络安全,适应高风险对关键基础设施的挑
【目的】了解上海市杨浦区学龄前儿童行为问题发生现况,探讨学龄前儿童心理行为问题的影响因素,以便更好地进行儿童心理卫生保健工作。【方法】采取整群随机抽样的方法,抽取
本研究以传统发酵酸奶工艺为基础,以鲜牛奶和燕麦芦荟果料为主要原料,接种混合发酵菌种,以白砂糖为调味剂,通过改变燕麦芦荟果料添加工艺,来优化燕麦芦荟酸奶品质和功效。确
目的:本实验拟通过侧脑室注射苯并[a]芘染毒SD大鼠,并应用免疫组化、免疫印迹和实时荧光定量PCR等相关方法检测P25、CDK5和HDAC1在苯并[a]芘致中枢神经系统疾病中的表达,初步
随着经济与科技的快速不断进步,食品药品安全问题也变得越来越多,近些年在我国各地的食品药品微生物安全风险监测中就检出几十种致病菌,由于传统检测方法耗费时间较长,操作繁
吸烟危害人体健康的同时也增加国家公共健康的经济负担。烟草消费行为调查目前以问卷调查为主,该调查方法存在时间长、费用高、工作量大的特点,为克服传统方法的弊端,发展出
六、精神疾病是可以预防和治疗的。精神疾病的防治分为三级。一级预防的目的是减少精神疾病的发生,二级防治的目的是降低精神疾病的危害,三级防治的目的是减少精神疾病所致的残
针对内燃机在线性能监测和故障诊断的需求,利用PCL-818HD数据采集卡完成了内燃机工况参数数据采集系统的硬件设计,整个系统由便携式工控机、数据采集卡、传感器及其调理电路等
我厂生产的各类零部件,为了贯彻落实全面质量管理的可追溯性的要求,往往需要在出厂的各零部件上记录出厂编号(年/月/顺序号等),尤其在关键、重要零部件上,为防止零件表面破坏和引起零