血管紧张素Ⅱ对创伤愈合中成纤维细胞增殖的研究

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一目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对创面愈合中成纤维细胞增殖的影响及不同浓度AngⅡ对创面作用的差异,旨在为今后的临床治疗提供实验参考依据。二方法:1模型制作:10只SD雄性大鼠,体重175200g,由山西医科大学生理教研室动物中心提供。每只4个创面,分属4组(NS组、低剂量组、中剂量组、高剂量组),即每组10个创面。于致伤当天,减去其背部长毛,碘伏消毒。采用戊巴比妥做腹腔注射麻醉动物,固定后用专业打孔器打孔(孔1.5㎝×1.5㎝),造成动物背部两侧各2个约1.5㎝×1.5㎝的全层皮肤缺损创面。2创面用药方法:NS组,创面治疗药物为生理盐水;低剂量组,创面治疗药物为1×10-9 mol/ml AngⅡ溶液;中剂量组,创面治疗药物为1×10-8 mol/ml AngⅡ溶液;高剂量组,创面治疗药物为1×10-7 mol/ml AngⅡ溶液。每组动物创面都用饱含治疗药物的纱布湿敷,外加无菌保湿贴膜覆盖,创面每天更换敷料一次,直到第5天。各组动物均单独喂养,自由饮水、进食。3检测指标和方法:观察动物背部4个创面,分别于伤后第5天用透明膜描计加运用MIG2000软件计算创面面积;取动物背部4个约1.0㎝×1.0㎝创面组织,做组织匀浆,离心取上清,制成单细胞悬液。PI染色后,应用流式细胞仪检测10000个细胞中S期(DNA合成期)成纤维细胞所占的比例。4统计方法:数据用SPSS13.0处理,计量资料以均数±标准差((x|-)±S)表示,数据分析采用重复测量设计的方差分析,检验标准以P<0.05为有显著性差异。三结果:1创面面积计算:伤后第5天时,各组创面面积高剂量组(1×10-7 mol/mL)最小,创面面积为202.6±0.2㎜2;NS组(生理盐水)最大,为215.53±0.28㎜2,两组间创面愈合率有显著性差(P<0.05)。其余两组创面面积分别为:低剂量组209.56±0.29㎜2,中剂量组207.03±0.26㎜2;各组间创面面积两两比较均有明显差异(P<0.05)。2创面组织细胞周期测定结果:应用AngⅡ的各组创面S期细胞百分比高于NS对照组,有统计学意义(P<0.05);且AngⅡ各不同浓度组间S期细胞百分比差异亦有统计学意义(P<0.05)。随用药物浓度的增高,S期细胞所占比例增多。四结论:1局部应用血管紧张素Ⅱ对全身血管收缩无明显影响,是安全可行的。2局部应用血管紧张素Ⅱ对鼠全层皮肤缺损创面愈合有促进作用,可能与局部应用血管紧张素Ⅱ可加速创面组织成纤维细胞的分化、增殖有关。3局部应用血管紧张素Ⅱ可加速创面愈合。4局部应用血管紧张素Ⅱ治疗鼠全层皮肤缺损创面,浓度为1×10-7 mol/mL时治疗效果最佳,其疗效存在药物剂量-生物效应关系。
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