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新人参二醇（neopanaxadiol, NPD）是通过人参总皂苷的酸降解分离得到的人参二醇型皂苷，药理实验表明其具有一定的神经保护作用。目前，关于NPD在动物体内的药代动力学研究尚未见报道。本研究首次建立了测定大鼠和比格犬生物样品中NPD的超高效液相串联四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)分析方法。在此基础上，研究了口服给予NPD后的血药动力学、组织分布及药物排泄、体内代谢和血浆蛋白结合率情况。根据实验结果，从大鼠粪样中分离出主要代谢产物M2，经核磁共振波谱法（NMR）和高分辨质谱法（HR-MS）确证其结构，并建立了测定大鼠生物样品中M2的UPLC-Q/TOF-MS分析方法，检测出其在大鼠粪样中的排泄量。本研究首次明确了NPD在动物体内的吸收、分布、代谢、排泄规律，为进一步了解NPD的药理活性和毒性提供了实验基础，促进了达玛烷型人参皂苷元体内代谢过程的深入研究。一、NPD生物样品分析方法的建立本文首先建立了测定生物样品中NPD的快速、专属性强的UPLC-Q/TOF-MS分析方法。采用液液萃取法(liquid-liquid extraction, LLE)对生物样品中的待测物NPD和内标人参二醇(PD)进行提取，经Zorbax SB C18柱色谱分离，质谱检测系统采用电喷雾离子源(ESI)，正离子检测方式，在多反应监测(MRM)模式下，NPD和PD的定量离子对均为m/z461.4→425.4。根据FDA、SFDA的相关规定，对比格犬血浆、大鼠脑组织、骨骼肌组织、尿液样品和粪样分析方法进行了完整的方法学确证，对定量下限(LLOQ)、线性、专属性、准确度、精密度、提取回收率、基质效应及稳定性进行了考察，结果显示各个指标均满足相关规定的要求。二、NPD在比格犬体内的血药动力学研究应用所建立的UPLC-Q/TOF-MS分析方法，对单剂量灌胃给予NPD后的比格犬体内血药动力学特征进行研究。体内血药动力学实验结果表明，口服给药后NPD的T1/2为3.18±1.14h，Tmax为2.67±0.26h，Cmax为913.44±229.44ng·mL-1，AUC(0–t)为6132.89±2748.39ng·h·mL-1，MRT(0–t)为6.37±1.51h。以上结果表明，口服给药后，NPD在比格犬体内吸收较难，血药浓度曲线下面积小。三、NPD大鼠血浆蛋白结合率研究采用平衡透析法对NPD的大鼠血浆蛋白结合率进行研究，通过建立的血浆及透析液中NPD的UPLC-Q/TOF-MS分析方法，测定了不同浓度NPD在大鼠血浆中的蛋白结合率。结果表明，NPD在低、中、高三个浓度水平下的大鼠血浆蛋白结合率分别为(85.24±4.59)%、(76.35±2.66)%和(78.33±1.32)%。说明NPD在大鼠体内主要以与血浆蛋白结合的形式存在。四、NPD在大鼠体内的组织分布研究通过建立的测定大鼠组织样品中NPD的UPLC-Q/TOF-MS分析方法，定量分析NPD在大鼠体内脑、心、肝、脾、肺、肾、胃壁、脂肪、睾丸、卵巢、胰脏等21种组织的浓度，了解其在大鼠体内各组织的分布情况。结果表明，NPD进入大鼠体内主要分布在胃肠道内，少量药物以原形广泛分布于全身各组织，且在各组织内不易蓄积。五、NPD在大鼠体内的排泄研究通过建立的测定大鼠生物样品中NPD的UPLC-Q/TOF-MS分析方法，对NPD经大鼠灌胃给药后不同时间段的尿液、粪样排泄情况进行研究。结果表明，大鼠灌胃给予NPD后，12-24h在尿中达最大排泄速率，96h内占给药剂量0.0233±0.0356%的原药从尿中排出，约给药后48h NPD在尿中的累积排泄曲线达到平衡；8-12h在粪中达最大排泄速率，96h内占给药剂量64.56±20.32%的原药从粪中排出，约给药后24h NPD在粪样中的累积排泄曲线达到平衡。说明NPD的主要排泄途径为粪样排泄。六、NPD的主要代谢产物分离、结构确证和代谢途径研究利用UPLC-Q/TOF-MS对大鼠灌胃给药后NPD的代谢产物及生物转化途径进行探索。将给药后的大鼠胃样、肠样、尿样和粪样与相应的空白生物基质在同样条件下得到的色谱质谱信息进行比对，考察NPD在大鼠体内的生物转化情况。NPD进入大鼠体内主要发生脱氢、环氧化及羟基化反应，其中环氧化为主要代谢途径。主要代谢产物M2从粪样中提取分离得到，并经NMR和HR-MS确证其结构为(20S,22S)-达玛-22,25-环氧-3β,12β,20-三醇。七、NPD主要代谢产物M2在大鼠体内的排泄研究首先建立了测定大鼠粪样中M2的UPLC-Q/TOF-MS检测法，并对分析方法进行完整的方法学确证。在此基础上通过灌胃给药，在特定时间点采集并检测大鼠粪样中M2的含量。通过计算M2经此途径排泄的速率及排泄量情况，阐明其在大鼠粪样中的药代动力学途径。结果表明，大鼠灌胃给予NPD后，8-12h M2在粪中达最大排泄速率，48h内占给药剂量0.6445±0.1730%的氧化代谢产物从粪中排出，约给药后24h其在粪样中的累积排泄曲线达到平衡。