基于BDNF-TrkB信号通路探讨交泰丸对慢性束缚应激大鼠抗焦虑作用的机制研究

来源 :天津中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:liongliong586
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目的:通过慢性束缚应激建立大鼠焦虑模型,观察交泰丸对慢性束缚应激大鼠一般状态、体重和行为学的影响,并通过检测大鼠海马糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor,GR)、脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)、酪氨酸激酶受体B(Tropomyosin receptor kinase B,Trk B)和p-Trk B蛋白表达水平,以及BDNF m RNA和Trk B m RNA的表达水平,探讨交泰丸的抗焦虑作用机制。方法:选取Wistar雄性大鼠60只,按体重和旷场实验结果随机将大鼠分为空白组、模型组、地西泮组和交泰丸低、中、高剂量组,每组10只,分笼饲养。空白组不进行任何刺激,其余各组采用14天慢性束缚应激法建立大鼠焦虑模型。交泰丸各剂量组和地西泮组在每天束缚前分别灌服交泰丸低剂量(0.75 g生药/kg)、中剂量(1.5 g生药/kg)、高剂量(3 g生药/kg)和地西泮(地西泮,1 mg/kg),空白组和模型组灌服等量超纯水。观察大鼠一般状态和体重变化情况,观察大鼠旷场实验(直立次数和运动总距离)和明暗箱实验(穿箱次数和明箱停留时间)以反映大鼠焦虑状态。采用蛋白免疫印迹法(Western bloting)测定大鼠海马组织中GR、BDNF、Trk B和p-Trk B蛋白表达水平。采用RT-PCR法测定大鼠海马BDNF m RNA和Trk B m RNA的表达水平。结果:1.交泰丸对慢性束缚应激大鼠一般状态和体重的影响:经过14天慢性束缚应激,与空白组相比,模型组大鼠有精神紧张,容易躁怒,毛皮直立散乱、变黄发暗,喜蛰伏角落,大便不成形的症状,交泰丸各剂量组和地西泮组焦虑表现较模型组有所改善。大鼠体重变化情况:与空白组相比,模型组大鼠体重显著减轻(P<0.01);与模型组相比,地西泮组大鼠体重显著增加(P<0.05),交泰丸各剂量组大鼠体重有增加趋势,但无统计学差异。2.交泰丸对慢性束缚应激大鼠行为学影响:在旷场实验中,模型组大鼠经过14天的慢性束缚应激后,与空白组相比,大鼠直立次数和运动总距离均明显减少(P<0.01);与模型组相比,交泰丸中剂量组和地西泮组大鼠直立次数显著增加(P<0.05),交泰丸高、低剂量组有增加趋势,但无统计学差异;与模型组相比,交泰丸低、中、高剂量组和地西泮组大鼠运动总距离明显增加(P<0.05或P<0.01)。在明暗箱实验中,模型组大鼠经过14天的慢性束缚应激后,与空白组相比,大鼠穿箱次数和明箱停留时间均明显减少(P<0.01);与模型组相比,交泰丸低、中、高剂量组和地西泮组大鼠穿箱次数显著增多(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,交泰丸中剂量组和地西泮组大鼠明箱停留时间显著增加(P<0.05)。3.交泰丸对慢性束缚应激大鼠BDNF-Trk B信号通路的影响:交泰丸对慢性束缚应激大鼠海马GR、BDNF、Trk B和p-Trk B蛋白表达水平的影响:经过14天慢性束缚应激后,与空白组相比,模型组大鼠海马GR、BDNF、Trk B和p-Trk B蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,交泰丸各剂量组和地西泮组大鼠海马BDNF和p-Trk B蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,交泰丸低剂量组大鼠海马GR蛋白表达水平显著升高(P<0.05),交泰丸中、高剂量组和地西泮组大鼠海马GR蛋白表达水平有升高趋势,但无统计学差异;与模型组相比,交泰丸低、中剂量组和地西泮组大鼠海马Trk B蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01),交泰丸高剂量组大鼠海马Trk B蛋白表达水平有升高趋势,但无统计学差异。交泰丸对慢性束缚应激大鼠海马BDNF m RNA和Trk B m RNA表达水平的影响:经过14天慢性束缚应激后,与空白组相比,模型组大鼠海马BDNF m RNA和Trk B m RNA表达水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,交泰丸各剂量组和地西泮组大鼠海马BDNF m RNA和Trk B m RNA表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:交泰丸能够改善慢性束缚应激大鼠焦虑样行为,可能是通过改善BDNF-Trk B信号通路关键因子水平实现的。
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