自1929年弗莱明从真菌中发现青霉素以来,微生物就成为人们获得活性物质的丰富资源。在过去的70多年里,已经从微生物中发现了30000～50000中天然产物,其中10000多种有生物活性,8000多种是抗菌和抗肿瘤剂。然而由于抗药病原菌的蔓延,新病原菌的出现以及癌症和心血管等新疾病的增加,寻找新的活性物质源泉成了当务之急,因此科学家把注意力投向了一个尚未很好开发的巨大天然资源宝库一海洋。1964年,Schmeer首先从文蛤中分离出具有抗肿瘤活性的多糖类化合物蛤素,从此敲响了向海洋要生活活性物质的大门,以后的几十年里世界各国纷纷进军海洋,美、日、英、法、俄等国家分别推出包括开发海洋微生物药物在内的“海洋生物技术计划”、“蓝宝石计划”、“海洋生物开发计划”等。海洋也以其低温、高压、寡营养、高盐等独特的环境使得生活于其中的微生物产生出结构新颖多样、活性独特的天然产物。 在我国的四大海域中,渤海、黄海和南海的微生物资源的研究较多,而对于东海海域微生物的大规模大面积的资源调查、活性菌种的筛选还未见报道。本课题组在2003年5月,从中国东海离岸35海里的区域采集了28个海水、海泥样本,利用稀释涂平板法从中分离得到1043株微生物样本,并利用稻瘟霉模型作为活性初筛模型,得到216株对稻瘟霉具有较强抑制活性的菌株。本论文选取了其中一株活性较强的F8712进行了菌株的16S rDNA的PCR扩增鉴定以及一系列生理生化特性的研究,并对该菌株进行了最适发酵条件的摸索。大规模发酵后对发酵液的化学成分进行了分离纯化和化合物的结构鉴定,并对这些化合物进行了生理活性的研究。 研究结果显示,F8712菌株是一种弱嗜盐菌,最适生长盐度为2.5%。进一步研究发现,该菌在25℃、振荡频率120r/min、发酵初始pH值为6.0、接种量5%、72～120h内收获时活性最强;发酵培养基配方为蛋白胨0.4%、酵母提取物0.4%,牛肉膏1% 葡萄糖1%。 16S rDNA序列扩增、比对及构建进化树显示F8712与Bacillus subtilis strain BFAS的进化位置最接近,它们的相似性高达99.67%,因此鉴定其为枯草芽孢杆菌。生理生化特性的研究显示该菌有着陆地枯草芽孢杆菌的一些基本特性。