松树脂溃疡病随木材传入中国的风险分析及检疫鉴定技术的研究

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松树脂溃疡病(Fusarium circinatum Nirenberg & O’Donnell)为美国、南非等国外针叶树上发生的一种危险性林木病害。病害主要引起树干、枝条产生流脂、溃疡等症状。本文遵循联合国粮农组织(FAO)国际植物保护公约(IPPC)的有害生物分析准则,从地理和管理标准、定殖的可能性、定殖后扩散的可能性、经济影响评估以及随松树脂溃疡病疫区的木材、木质包装传入的可能性等5方面对松树脂溃疡病菌进行了风险评估,结果证实该病原菌符合检疫性有害生物的地理标准和管理标准,在中国定殖的可能性极大,定殖后扩散的可能性极大,经济影响极大,随病害疫区的木材、木质包装进入可能性极大,所以,松树脂溃疡病菌随疫区的木材、木质包装传入中国的风险极高,因此,对其疫区国家输华木材、木质包装采取紧急的植物检疫措施是必要和紧迫的,完全符合SPS协议原则和国际惯例。本文系统的总结了松树脂溃疡病菌的检疫及形态学鉴定方法,并研究了该病菌的分子检测方法。根据GenBank中登录Fusarium属的31种核糖体基因内间隔区(IGS)序列,设计Fusarium属IGS上的一段通用引物G1/G2,可扩增873 bp左右的条带。进一步根据Fusarium属IGS序列差异设计一对引物S1/S2,可特异性从F.circinatum菌株中扩增到一条364 bp左右的条带,而从其他供试菌株中不能扩增出条带,表明该对引物可以将F.circinatum与Fusarium属中的其他种分开。利用上述2对引物组合建立巢式PCR检测体系,能够直接将F.circinatum与其他相似种和相关种分开,且灵敏度可达DNA浓度5×10-3 pg.μl-1,10个孢子/100μl H2O。另外,本试验还采用人工污染模拟种子、土壤、木材带菌,模拟情况基本与实际情况相吻合,利用该体系可直接从土壤、木材以及种子中快速、灵敏、准确检测到松树脂溃疡病菌。
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