<'60>Co-γ射线对八宝景天的辐射效应及变异植株的分析

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八宝景天(Sedum spectabile Bareau),景天科景天属,多年生草本植物,别名:蝎子草。八宝景天因其抗逆性强,养护费用低,生长繁茂等优点在园林景观设计中常作为地被植物被广泛应用。本试验采用八宝景天扦插植株与60Co-γ射线结合进行辐射诱变育种,确定诱导植株变异的适宜辐射剂量;利用形态学、生理学、细胞学原理观察其形态变化、生理指标(叶绿素含量、SOD、POD、CAT活性)变化与叶片气孔形态,分析60Co-γ射线对八宝景天植株的辐照效应;并通过ISSR分子标记和聚类分析方法对突变株的遗传多样性进行了分析,其结果表明:(1)辐射材料部位的选择与辐射敏感性关系密切,顺序是:上部茎植株>下部茎植株,上部茎植株为最佳辐射诱变材料。(2)八宝景天扦插苗的半致死剂量LD50为100Gy,可诱导植株变异的最适剂量为50Gy。(3)辐射后八宝景天变异株或变异枝的产生方式主要有四种:植株长到一定程度发生分枝且主干顶端单生;主干上互生很多枝,顶端生长停滞;在同一叶腋处产生多个分枝、在一个植株干的同一轮处互生很多枝;地上植株死亡后从根部长出新的M1代变异株。(4)辐射后植株的性状变异早期主要表现在叶型、株型、花型上。叶型变异表现为叶片不对称、叶色白或黄有条纹、扭曲、叶尖内凹或开裂、双叶脉等;株型变异表现为植株矮化、节间短、茎粗大、分枝多样等;花型变异表现为花序直径和花朵直径大,花色深,花瓣变异数目增多,花期延长。(5)叶绿素含量与辐射剂量之间呈负相关性;SOD、POD活性随着辐射剂量增加先升高后降低;CAT活性在30Gy剂量处升高到活性峰值后下降,70Gy到100Gy略有小幅上升。(6)辐射对植株叶片气孔形态影响显著:50Gy变异植株叶片气孔较对照植株叶片气孔开度大,30Gy下陷严重,气孔紧闭。(7)首次建立八宝景天ISSR-PCR反应体系:总体积20μL,10×Buffer (Mg2+free) 2.0μL,dNTPs 2mmol/L,引物750nmol/L,DNA模板25ng,Taq DNA polymerase 1U,Mgcl2 2mmol/L。PCR扩增条件:94℃预变性7min,35个热循环,每个热循环包括:94℃变性45s,52℃退火1min,72℃延伸1.5min,结束循环后72℃延伸4min。(8)样品间的遗传相似系数(GS)在0.5805~0.7886之间,平均相似系数为0.6846;利用ISSR技术对辐射八宝景天植株的遗传相似性进行了鉴定和分析,筛选出观赏价值高的变异植株M0-1、M0-2、M0-3、M0-4、M0-5。
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