高血压病气虚血瘀证患者血清对CRL-1730凋亡相关蛋白及细胞活性的影响

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jianglihongnj
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目的:为进一步明确高血压病气虚血瘀证患者血清诱导人脐静脉内皮细胞株(CRL-1730)凋亡的效应,并对其机制进行探讨,同时观察补阳还五汤对凋亡细胞的干预效应,为高血压病气虚血瘀证的临床防治提供实验依据。方法:分别收集高血压病气虚血瘀证患者、高血压病非气虚血瘀证、健康体检者的血清及补阳还五汤高、中、低剂量组含药血清,分别作用于体外培养的人脐静脉内皮细胞株,用ELISA检测细胞培养上清液凋亡相关蛋白含量,WB检测细胞凋亡相关蛋白表达,倒置相差显微镜观察细胞形态学,MTT法检测细胞增殖活性,台盼蓝法检测活细胞率,并观察补阳还五汤的保护作用。结果:1、ELISA检测结果:与健康组相比,高血压病气虚血瘀证组、高血压病非气虚血瘀证组细胞上清液中的β-微管蛋白、Caspase-3、Fas、FasL、Bax、Bax/Bcl-2表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),高血压病气虚血瘀证组、高血压病非气虚血瘀证组细胞上清液中的Bcl-2表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。另外,与高血压病气虚血瘀证组相比,补阳还五汤高、中、低剂量组细胞上清液中的β-微管蛋白、Caspase-3、Fas、FasL、Bax、Bax/Bcl-2表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),Bcl-2表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2、WB检测结果:与健康组相比,高血压病气虚血瘀证组、高血压病非气虚血瘀证组细胞中的β-微管蛋白、Caspase-3、Fas、FasL、Bax、Bcl-2、Bax/Bcl-2表达量无统计学差异(P>0.05);与高血压病气虚血瘀证组相比,补阳还五汤高、中、低剂量组蛋白表达量也无统计学差异(P>0.05)。3、由倒置相差显微镜观察发现,高血压病气虚血瘀证组存在细胞形态学改变。4、MTT法检测结果:与健康组相比,高血压病气虚血瘀证组、高血压病非气虚血瘀证组OD值减少,差异有统计学意义(P<0.05);与高血压病气虚血瘀证组相比,补阳还五汤各剂量组OD值逐渐增加,差异有统计学差异(P<0.05)。5、台盼蓝染色法检测结果:与健康组相比,高血压病气虚血瘀证组和高血压病非气虚血瘀证组均有不同程度降低;与高血压病气虚血瘀证组相比,补阳还五汤各剂量组活细胞计数百分比均升高。在光学显微镜下观察台盼蓝各组染色细胞分析,高血压病气虚血瘀证组、高血压病非气虚血瘀证组染色最多,补阳还五汤各剂量组次之,健康组染色最少。结论:高血压病气虚血瘀证患者血清可以诱导体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株的凋亡,补阳还五汤对其凋亡有一定的保护作用,这种保护作用可能与降低β-微管蛋白和凋亡相关蛋白Bax、Fas、FasL、Caspase-3的表达量有关。
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