卵母细胞和胚胎玻璃化冷冻保存是一种较理想的冷冻保存技术方法,较其他的冷冻技术可显著提高冷冻保存卵母细胞和胚胎的存活率和发育率。已有的研究表明,卵母细胞玻璃化冷冻后活性氧水平增加,线粒体DNA拷贝数和线粒体细胞色素C氧化酶活性降低,认为卵母细胞氧化还原状态与葡萄糖转运及代谢之间存在联系。本研究以小鼠卵母细胞为对象,利用荧光定量PCR、免疫荧光染色和蛋白免疫印迹等技术方法对玻璃化冷冻-解冻卵母细胞葡萄糖转运能力、NAPDH、ROS、GSH、ATP和GLUT1等指标进行检测,研究玻璃化冷冻对卵母细胞葡萄糖转运水平的影响,探索小鼠卵母细胞玻璃化冷冻导致葡萄糖摄取及代谢异常原因,并进行了改善冷冻卵母细胞葡萄糖转运及代谢水平的方法研究。获得了以下研究结果:1.玻璃化冷冻卵母细胞对葡萄糖转运及代谢的影响研究结果表明,小鼠卵母细胞玻璃化冷冻后葡萄糖摄取能力显著降低（p<0.01）,细胞内能量生成受阻,检测到ATP含量降低（p<0.01）。氧化还原状态异常,NADPH和GSH水平显著降低（p<0.01）,ROS水平显著升高（p<0.01）。表明卵母细胞玻璃化冷冻后,葡萄糖转运能力降低,卵母细胞能量生成及氧化还原状态受到影响。2.玻璃化冷冻卵母细胞葡萄糖转运蛋白GLUT1的表达水平检测表明,卵母细胞玻璃化冷冻后Glut1的m RNA水平降低（p<0.01）,GLUT1蛋白表达和GLUT1在细胞膜上表达水平均降低（p<0.01）。3.为了研究卵母细胞葡萄糖转运蛋白GLUT1的功能,在未冷冻卵母细胞培养液中添加GLUT1抑制剂后,GLUT1蛋白表达减少、AMPK磷酸化增加,表明成功抑制GLUT1。葡萄糖转运能力降低,NADPH,GSH水平降低,ROS水平增高,ATP水平降低（p<0.01）,与冷冻后卵母细胞检测到的相关异常表现一致。表明卵母细胞冷冻后的葡萄糖转运水平及代谢异常与GLUT1表达水平降低关系密切。4.在卵母细胞解冻和复苏过程中添加维生素C后,检测GLUT1表达水平发现与未冷冻组在m RNA水平、蛋白水平均差异不显著（p>0.05）。同时卵母细胞中NADPH、ROS和GSH水平以及卵母细胞内ATP生成与未冷冻组一致（p>0.05）;冷冻卵母细胞的复苏率、卵裂率和囊胚率均显著高于未添加维生素C冷冻组卵母细胞（p<0.05）,与未冷冻卵母细胞组无显著差异（p>0.05）。综上所述,玻璃化冷冻卵母细胞会造成葡萄糖转运能力下降、代谢异常。在解冻和复苏过程中加入维生素C能改善冷冻卵母细胞的葡萄糖转运能力,提高冷冻卵母细胞的质量。该研究对于卵母细胞的冷冻保存利用以及冷冻卵母细胞的胚胎发育潜能、安全性提高具有重要指导作用。