论文部分内容阅读
第一部分携sialyl lewis~x超声造影剂的构建及体外寻靶实验研究目的构建携sialyl lewis~x的靶向脂质微泡超声造影剂，体外评价其靶向黏附性能。方法采用“生物素-亲和素”桥连法制备携sialyl lewis~x的靶向超声脂质微泡（MBs），检测普通脂质微泡与靶向脂质微泡的一般物理特性，观察配基与脂质微泡结合情况及结合率。建立经肿瘤坏死因子（TNF-α）刺激处理的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）炎症模型，荧光半定量分析细胞的p-选择素的表达情况。普通光镜下观察携sialyllewis~x脂质微泡及普通脂质微泡与“炎症”人脐静脉内皮细胞的体外靶向黏附能力。结果sialyl lewis~x能与脂质微泡高效连接，结合率为93.93%，微泡大小较均一，平均粒径为1.63±0.23μm，形态规则呈球形，分散度好，无粘连聚集，与普通超声造影剂比较无明显差异；激光共聚焦荧光显微镜见TNF-α刺激后的HUVEC胞浆内及细胞膜上p-选择素表达明显增高。携sialyl lewis~x脂质微泡大量黏附于“炎症”HUVEC表面三组对照组中未见微泡与HUVEC结合。结论成功构建出携sialyl lewis~x脂质微泡超声造影剂，该靶向声学造影剂能与炎症状态下的HUVEC高效、特异性结合，为动物体内血管早期炎症病变的超声分子显影奠定了基础。第二部分携sialyl lewis~x超声造影剂体内靶向显影动物实验研究目的评价构建的携sialyl lewis~x超声造影剂（MBs）在体内血管内膜炎症的靶向分子显影能力。方法采用机械振荡法制备生物素化的脂质微泡（MBb）及携sialyl lewis~x靶向微泡超声造影剂(MBs)，激光共聚焦荧光显微镜下观察及检测靶向微泡的连接情况。经股动脉以球囊机械拉伤术建立大鼠腹主动脉内膜炎症损伤模型，免疫组化检测损伤的血管内膜P-选择素表达，16只350g～400gSD大鼠，随机分成对照组和实验组,模型建立前后经尾静脉，分别给予对照组MBb、实验组MBs超声造影剂，行对比超声检查，DFY定量诊断仪分析图像视频强度及持续显影时间，比较2组造影剂显影特点。结果成功制备携sialyl lewis~x靶向超声造影剂及大鼠腹主动脉内膜炎症损伤模型，免疫组化可见损伤的血管内膜P-选择素大量表达。建模前，2种造影剂显影结果无明显差异；建模后，靶向造影剂与普通造影剂相比较，内膜视频强度明显增强，且显影时间明显延长（p均<0.05）。结论携sialyl lewis~x靶向超声造影剂能与血管内皮细胞表面P-选择素特异性结合，有望成为动脉粥样硬化性疾病早期炎症病变的检测评估手段。