主动外排系统介导鲍曼不动杆菌多重耐药机制的研究

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目的:了解本地区临床分离鲍曼不动杆菌对20种常用抗菌药物的耐药情况;检测鲍曼不动杆菌三种RND主动外排泵结构基因、耐消毒剂基因和四环素耐药基因的分布情况,探讨RND主动外排系统,四环素耐药基因及耐消毒剂基因的存在与介导细菌多重耐药之间的关系,为多重耐药鲍曼不动杆菌感染的治疗提供实验依据。方法:琼脂二倍稀释法测定临床分离的112株鲍曼不动杆菌对20种临床抗菌药物的MIC和外排泵抑制剂CCCP对菌株MIC的影响;PCR扩增分别检测RND主动外排系统的结构基因adeB、adeJ和adeG,耐消毒剂基因qacE△1和四环素耐药基因tetA,tetB,并分析三类基因检出率与多重耐药的关系。结果:112株鲍曼不动杆菌临床分离株科室分布以ICU(38.4%)和呼吸内科(16.1%)为主,标本主要来源为痰液(75.0%)。药敏实验结果显示鲍曼不动杆菌对多粘菌素B敏感率最高(100%),其次是亚胺培南和美罗培南,敏感率分别为82.4%和86.8%,其余抗菌药物的敏感率较低,在4.3-53.9%之间。对临床常用的头孢菌素类(头孢吡肟除外)、青霉素类、氨基糖苷类以及喹诺酮类药物耐药率都在70%以上。庆大霉素﹑氯霉素﹑四环素﹑头孢唑啉加入CCCP后显示出主动外排阳性菌株数量分别有58株(51.7%)、18株(16.1%)、13株(11.6%)、2株(1.7%)。在使用CCCP后庆大霉素的MIC值较使用前显著降低。adeB、adeJ及adeG的检出率分别达到了64.3%(72/112)、75.9%(85/112)和57.1%(64/112),同时检出adeB、adeJ、adeG的菌株占49.1%(55/112)。同时检出adeB、adeJ和adeG的细菌对头孢曲松、头孢吡肟、庆大霉素、四环素和氯霉素五种药物耐药程度最严重;对7种药物耐药程度均显著高于仅检出adeB菌株、adeJ菌株和未检出三种RND外排泵结构基因的菌株。qacE△1阳性检出率为73.2%(82/112)。消毒剂耐药基因阳性株(82/112)对14种抗菌药物的耐药率均明显高于消毒剂的耐药基因阴性株(30/112),且其多重耐药率(90.2%)高于消毒剂的耐药基因阴性菌株(70.0%)。在112株鲍曼不动杆菌中,对四环素耐药的细菌有76株,32.8%检测到tetA(25/76),73.6%检测到tetB(56/76),30.2%同时检测出tetA与tetB(23/76);对四环素敏感的细菌有29株,3.4%检测到tetA(1/29),6.9%检测到tetB(2/29)。112株鲍曼不动杆菌tetB阳性检出率为55.3%(62/112),多重耐药率(96.7%)高于tetB阴性株(70.0%)。结论:1、本地区鲍曼不动杆菌临床分离株对常用抗菌药物的耐药情况严重,碳青霉烯类、米诺环素以及多粘菌素B是多重耐药鲍曼不动杆菌感染治疗的有效药物。2、RND主动外排系统结构基因adeB、adeJ和adeG在鲍曼不动杆菌临床分离株有较高检出率,与细菌多重耐药有关。3、耐消毒剂基因在本地区鲍曼不动杆菌临床分离株的检出率较高,且在鲍曼不动杆菌多重耐药中发挥重要作用。4、在耐四环素菌株中检测出tetA和tetB,尤其tetB检出率较高,与四环素类抗生素耐药关系密切。
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