水稻LA1互作蛋白的鉴定与功能研究

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水稻是世界上最主要的粮食作物之一,培育高产水稻品种与粮食安全息息相关。理想的水稻株型是培育高产水稻的基础与前提。分蘖角度作为水稻株型的主要决定因素之一,不但影响了水稻单株的生长状况,而且在很大程度上决定了群体的有效栽培密度,是单位面积作物产量的重要控制因素。深入研究水稻分蘖角度的调控机理对于培育高产水稻新品种具有重要的指导作用。  植物通过感受重力作用,调控自身生长方向,以维持各器官与重力方向最适角度的现象称为植物的重力反应。该现象能够帮助植物各器官更好地行使其生物学功能,在植物的整个生命过程中发挥着重要作用。重力反应通过影响水稻分蘖的生长方向,调控了水稻的分蘖角度,对于农作物生产具有重要影响。  水稻分蘖角度异常突变体lazy1(la1),最早报道于1938年,该突变体在抽穗及成熟期呈现主茎与分蘖匍匐生长的表型。2007年,LA1基因得到克隆。研究发现,LA1功能缺失突变导致水稻地上部分生长素极性运输增强,侧向运输减弱,影响了重力作用下正常生长素浓度梯度的形成,进而导致水稻地上部分重力反应缺陷及分蘖角度明显增大的表型。对LA1RNAi转基因株系表型分析发现,LA1的表达水平与水稻分蘖角度呈现负相关性,说明LA1对于水稻分蘖角度具有精细调控作用。LA1在洋葱表皮细胞中呈现细胞膜与细胞核的双重定位,但是具体作用机制仍不清楚。进一步研究LA1的作用机理对于理解水稻地上部分重力反应及分蘖角度的调控过程具有重要的理论和实践意义。  在本研究中,我们证实了LA1在细胞核中的定位是其正常发挥生物学功能所必需的。通过酵母双杂交的方法,我们筛选得到LA1-Interacting Protein l(LAIP1),其编码一个OsBRX家族蛋白,能够通过与LA1在细胞质膜处互作,显著抑制LA1在细胞核中的定位。遗传学研究发现LAIP1对水稻地上部分重力反应具有明显的负调控作用,LAIP1过表达转基因植株分蘖角度增大,而LAIP1与其同源基因LAIP1-like1,LAIP1-like2同时RNAi的转基因植株分蘖角度减小。LAIP1过表达转基因植株中生长素极性运输显著增强、侧向运输明显减弱,预示LAIP1可能通过影响重力作用下生长素的不对称分布调控水稻地上部分重力反应及分蘖角度。进一步对LA1与LAIP1的相互关系进行分析发现,LAIP1能够在植物体内调控LA1的细胞核定位,而LAIP1对水稻地上部分重力反应和分蘖角度的调控作用依赖于LA1的生物学功能。进一步对LAIP1特异缺失不同保守结构域的突变形式所进行的功能研究表明LAIP1的3个BRX domain在调控LA1亚细胞定位及水稻分蘖角度中发挥着特异而协同的重要作用。综合上述研究结果,LAIP1通过影响LA1的亚细胞定位调控LA1的功能,参与对水稻地上部分重力反应及分蘖角度的调控。LA1与LAIP1的相互作用有助于对水稻分蘖角度进行精细的调控,对于培育具有理想分蘖角度的水稻新品种具有重要的指导作用。
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