目的:通过将胰腺癌患者的新鲜肿瘤组织移植到小鼠皮下建立胰腺癌小鼠皮下移植瘤模型(PDX模型),探究课题组前期合成的KLK7小分子抑制剂在PDX模型上对胰腺癌的抑制作用。方法:(1)通过三峡大学伦理委员会批准,在三峡大学第一临床医学院肝胆胰外科住院的患者中随机选取一位,纳入标准为影像学及穿刺结果诊断胰腺癌,征得患者及家属同意并签署知情同意书后由临床医师完成手术,在肿瘤标本离体后切取一小部分,快速移植到小鼠皮下,构建胰腺癌PDX模型,模型构建成功后进行小鼠体内传代扩增。(2)肿瘤长到直径10mm左右后从小鼠皮下取出,HE染色评估病理特征、免疫组化验证KLK7表达情况。(3)PDX模型成瘤率稳定以后,将小鼠随机分为三组(对照组、10m M组及40m M组),每组给予对应浓度的课题组前期合成的KLK7小分子抑制剂,对照组给予同等体积的DMSO,实验过程中观察并记录每组小鼠的一般情况(精神、饮食、睡眠、大小便、皮肤等)、成瘤率(成瘤率=成瘤数/接种数×100%)、肿瘤体积(V=1/2×长径×短径2)及抑瘤率[抑瘤率=(对照组平均瘤重-实验组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100%]的变化情况等;实验结束后处死小鼠,取出肿瘤,称量瘤重,并对肿瘤及小鼠的重要脏器(心、肝、脾、肺、肾)进行HE染色,观察肿瘤病理特征及小鼠重要脏器是否受侵犯。结果:(1)成功构建胰腺癌PDX模型,接种后第14天左右,可于小鼠皮下接种部位触及大小不一的硬结,并完成了PDX模型在小鼠体内的传代扩增。(2)PDX模型肿瘤病理符合腺癌改变,免疫组化证明KLK7蛋白在该模型高表达。(3)PDX模型小鼠体内传代到第四代进行药效评价,各组小鼠体重变化趋势无明显差别,均随时间逐渐变大,但实验进行到第5周左右时高浓度组出现体重下降;各组小鼠成瘤率随时间增大,最终40m M组小鼠成瘤率75%,10m M组小鼠成瘤率91.67%,对照组小鼠成瘤率100%,实验组小鼠的成瘤率低于对照组;肿瘤体积随时间逐渐变大,实验组小鼠肿瘤体积小于对照组,差异具有统计学意义;40m M组肿瘤重量(0.124±0.113)g,10m M组肿瘤重量(0.234±0.172)g,对照组肿瘤重量(0.422±0.163)g,实验组肿瘤重量低于对照组,差异具有统计学意义;计算得出40m M组抑瘤率70.6%,10m M组抑瘤率44.5%,药物对肿瘤的抑制效果随浓度的增加而增强。由此得出药物干预后,小鼠皮下移植瘤的成瘤率及增殖能力较对照组受到明显抑制。肉眼观察重要脏器(心、肝、脾、肺、肾)未见明显转移征象,肿瘤HE染色符合典型的腺癌表现,小鼠重要脏器HE染色未见明显转移征象。结论:课题组前期合成的KLK7小分子抑制剂在高表达KLK7的胰腺癌PDX模型中展示了对胰腺癌肿瘤的抑制作用,进一步夯实了KLK7可能是胰腺癌潜在癌治疗靶点的观点。