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目的:检测分析新疆地区流行的各组不同耐药结核分枝杆菌临床分离株(以下简称为MTB)Pup-蛋白酶体系统(PPS)在不同抗生素压力下Pup基因、Dop基因、Mpa基因和Paf A基因的表达差异,探讨研究各组耐药MTB Pup-蛋白酶体系统(PPS)的基因表达水平是否与新疆地区流行的耐药MTB临床分离株耐药性呈一定相关性,以及MTB Pup-蛋白酶体系统(PPS)对MTB耐药性产生的作用及其机制。方法:将新疆地区流行的结核分枝杆菌临床分离株、单纯耐异烟肼的MTB临床分离株(INH-MTB)、单纯耐链霉素的MTB临床分离株(SM-MTB)、单纯耐利福平的MTB临床分离株(RFP-MTB)、单纯耐乙胺丁醇的MTB临床分离株(EB-MTB)、耐多药的MTB临床分离株(MDR),分别在原始耐药状态、低浓度含药培养基以及高浓度含药培养基上(抗生素压力环境)培养至对数生长期,分别提取各组耐药MTB总RNA,并立即进行逆转录。采用SYBR Green I Real-time PCR技术检测不同环境下各组耐药MTB Pup-蛋白酶体系统(PPS)的Pup基因、Dop基因、Mpa基因和Paf A基因的表达水平,探讨分析经过不同浓度抗结核药物(INH、RFP、SM、EB)的抗生素选择压力作用后,各组耐药MTB PPS的Pup基因、Dop基因、Mpa基因和Paf A基因的表达变化。结果:(1)与药物敏感菌株组相比,耐药性结核分枝杆菌临床分离株的Pup基因的mRNA表达水平在INH-MTB组、EB-MTB组、MDR组中表达显著下调;耐药性结核分枝杆菌临床分离株的Dop基因的m RNA表达水平在INH-MTB组、SM-MTB组、EB-MTB组中表达显著上调;耐药性结核分枝杆菌临床分离株的Paf A基因的m RNA表达水平在INH-MTB组、RFP-MTB组、SM-MTB组、EB-MTB组、MDR组中表达上调;耐药性结核分枝杆菌临床分离株的Mpa基因的m RNA表达水平在INH-MTB组、MDR组中表达显著下调,在SM-MTB组中表达显著上调,差异有统计学意义(P<0.05);(2)与原始耐药状态下耐药MTB临床分离株相比较,经低浓度抗结核药物压力作用培养后的各组MTB临床分离株,Pup基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB、MDR组中的表达分别下调;Dop基因、Paf A基因和Mpa基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB、MDR组中表达分别上调;差异有统计学意义(P<0.05);(3)与原始耐药状态下耐药MTB临床分离株相比较,经高浓度抗结核药物压力作用培养后的各组MTB临床分离株,Pup基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB、MDR组中的表达分别下调;Dop基因、Paf A基因、Mpa基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB、MDR组中表达分别上调,差异有统计学意义(P<0.05);(4)在高浓度抗结核药物条件下培养的各组耐药MTB临床分离株,与低浓度抗结核药物条件下培养的各组耐药MTB临床分离株相比,MTB Pup-蛋白酶体系统(PPS)的Pup基因、Dop基因、Paf A基因和Mpa基因的表达水平上调,差异有统计学意义(P<0.05);结论:(1)在原始状态下,MTB临床分离药物敏感菌株和四种单纯耐药(INH、RFP、SM、EB)MTB临床分离株菌株以及耐多药临床分离菌株(MDR)中,Pup基因、Dop基因、Paf A基因Mpa基因的表达存在一定差异;(2)在低浓度和高浓度的抗结核药物(INH、RFP、SM、EB)选择压力作用下,Pup基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB、MDR组的m RNA表达水平比原始状态下的各组耐药MTB显著下降;Dop基因、Paf A基因和Mpa基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB、MDR组的m RNA表达水平比原始状态下各组耐药MTB显著升高。