维甲酸衍生物是近年来颇受重视的肿瘤治疗药物,而CD437(又称AHPN;6-(3-(1-adamantyl)-4-hydroxyphenyl)-2-naphthalene carboxylic acid)是其中最受关注的一种。CD437诱导肿瘤细胞凋亡的研究目前已有众多的报道,最近发现, CD437还可以通过诱导细胞内核孤儿受体TR3/Nur77的易位而启动细胞凋亡。核孤儿受体TR3/Nur77是近年发现的新的凋亡效应蛋白,一般认为,TR3的主要功能是作为核转录因子调控一系列靶基因的转录。新近的研究却发现,除作为转录因子发挥作用外,当细胞受到一些诱导因子作用时 TR3/Nur77可以从细胞核进入细胞浆,定位于线粒体,通过与线粒体外膜Bcl-2蛋白作用,改变线粒体膜的通透性,使线粒体间质内的促凋亡蛋白释放,启动细胞凋亡。对于TR3/Nur77在细胞凋亡过程中的作用,目前尚有许多问题有待阐明,如可能存在的内源性配体及亚细胞定位对其功能的影响;磷酸化对 TR3/Nur77亚细胞定位及对凋亡诱导功能的影响等。　　本研究在以往文献报道及前期研究的基础上,通过免疫荧光观察、差速离心和蔗糖密度梯度离心分析、免疫沉淀和免疫印迹等方法,首次发现并证实核孤儿受体TR3/Nur77在细胞凋亡过程中的新的亚细胞定位,即内质网定位。随后,通过半定量 PCR、流式细胞术、激光共聚焦显微镜下细胞内钙离子检测、免疫印迹等方法,对TR3/Nur77的内质网定位在 CD437诱导的细胞凋亡过程中所发挥的重要作用进行了研究和阐明。研究结果表明,在人食管癌细胞 EC109、EC9706和人神经母细胞瘤细胞 SK-N-SH中,核孤儿受体 TR3/Nur77在细胞浆中的亚细胞定位除线粒体,还包括内质网。在 CD437等药物的作用下, TR3/Nur77可迅速转移到线粒体和内质网上,并分别经这两个细胞器启动细胞凋亡。在内质网上,TR3/Nur77可与 Bcl-2蛋白相互作用,影响内质网对细胞内钙离子浓度的调控,引起内质网应激反应,并通过激活 caspase-4启动细胞凋亡。另外,实验中还发现在上述细胞中,CD437可通过激活线粒体途径、内质网途径和外源性的死亡受体途径诱导细胞凋亡。　　综上所述,本研究首次发现并证实了在维甲酸衍生物 CD437诱导肿瘤细胞凋亡过程中,核孤儿受体 TR3/Nur77可以易位到内质网上,并通过启动内质网途径诱导细胞凋亡。同时发现并证实 CD437可通过多种凋亡途径诱导肿瘤细胞的凋亡。上述研究结果对于深入、完善细胞损伤和凋亡理论,明确细胞器的交互调节机制及抗肿瘤新药的研发具有深远意义,也有助于进一步认识疾病的本质,推动生命科学领域科研的发展。