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普通型胃腺癌伴神经内分泌(neuroendocrine,NE)分化,是指胃腺癌中有分化的神经内分泌细胞,但其数目在癌组织成分中所占的比例较小不足50%,且以单个细胞或细胞巢的形式分散存在,是弥漫神经内分泌系统的一部分。我们以往研究发现前列腺癌伴散在NE细胞分化约占38.1%,大肠癌和乳腺癌分别为41.5%和21%,且高分化癌NE细胞的发现率明显高于低分化癌。而普通型胃腺癌中,NE细胞分化约占39.6%,低分化腺癌明显高于高分化腺癌。这些差异是否与肿瘤所在部位的胚胎起源、肿瘤病因学、组织发生学的不同及遗传学改变有关,仍处于探索研究阶段。 与神经内分泌肿瘤相比,非神经内分泌肿瘤中NE细胞研究较少,特别是用分子遗传学方法研究普通型胃腺癌中单个NE细胞的起源方面尚未见报道。关于普通腺癌伴NE分化的发生机制存在许多不同的假说。目前多数人认为NE细胞和上皮细胞均来源于内胚层多潜能干细胞。在肿瘤发生及演进过程中,内胚层的多能干细胞受激素、局部微环境及基因组不稳定性的影响,使某些被抑制的基因组密码发生随机脱抑制,在RNA翻译水平选择性的激活两种以上的调节基因产生双向或多向分化。然而,这些推测仅建立在形态学的观察及体外实验的基础上,缺乏可靠性和再现性;且不同肿瘤组织中散在的NE细胞不论在形态上还是对肿瘤组织的生物学行为的影响上都存在很大区别,究竟散在的神经内分泌细胞是否存在染色体及相关基因水平的改变,它们是否为肿瘤的一种成分,尚不清楚。因此,我们对伴神经内分泌分化的普通型胃腺癌进行分子水平的研究,以期明确NE细胞的克隆性起源,对这一类型的胃肠道肿瘤做出新的评价。 激光显微切割技术的出现,使得我们能够从胃腺癌中获取单个散在的NE细胞。全基因组扩增技术是一项以微量(ng级)DNA为模板,通过Phi 29 DNA聚合酶强大的结合能力及3’—5’外切酶活性对全基因组进行高保真性地连续扩增,从而得到大量(μg级)基因组DNA的新技术,它弥补了模板量不足的问题。联合激光显微切割及全基因组放大,获取腺癌中NE细胞,提取DNA并与腺癌细胞进行分子水平改变的比较,在全基因组范围内寻找复制差异片段,推测其克隆起源。