替沃扎尼和帕唑帕尼通过细胞周期休止抑制甲状腺癌细胞和血管内皮细胞的增殖

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研究新型酪氨酸激酶抑制剂替沃扎尼和帕唑帕尼对甲状腺癌细胞株SW579和血管内皮细胞株HUVEC增殖的影响及作用机理。将SW579或HUVEC暴露于不同浓度(1、2、4、8和16μM)的替沃扎尼或帕唑帕尼至72h,无药物处理的细胞作为对照。采用CCK-8细胞活度测定、图像分析技术及分裂细胞荧光免疫染色观察评价替沃扎尼和帕唑帕尼对细胞增殖的影响,应用流式细胞仪进行细胞周期时相分析。细胞活度测定显示,替沃扎尼或帕唑帕尼对两种细胞的生长增殖均有明显的抑制作用(p<0.05),并呈浓度依赖性及时间依赖性,替沃扎尼在SW579和HUVEC细胞其半数抑制浓度(IC50)分别约为4μM、8μM,帕唑帕尼在SW579和HUVEC细胞其半数抑制浓度(IC50)分别约为2μM、4μM。图像分析显示,在IC50作用下,替沃扎尼和帕唑帕尼分别使两种细胞的细胞密度降低,分裂指数下降,替沃扎尼作用48h时,SW579细胞分裂指数(0.89%)明显低于其对照细胞(2.21%),p<0.05;HUVEC细胞分裂指数(2.26%)亦明显低于其对照细胞(3.98%),p<0.01。帕唑帕尼作用48h时,SW579细胞分裂指数(0.91%)明显低于其对照细胞(2.21%),p<0.01;HUVEC细胞分裂指数(1.93%)亦明显低于其对照细胞(3.98%),p<0.01。细胞周期时相分析表明,替沃扎尼和帕唑帕尼可使SW579和HUVEC发生细胞周期休止,替沃扎尼作用48h时,SW579在G1期的比例(72.5%)明显高于其对照细胞(54.5%),p<0.05;而HUVEC细胞在G2/M期的比例(48.6%)则明显高于其对照细胞(14.1%),p<0.05。帕唑帕尼作用48h时,SW579在G1期的比例(69.2%)明显高于其对照细胞(56.3%),p<0.05;而HUVEC细胞在S期的比例(44.6%)则明显高于其对照细胞(31.7%),p<0.05。替沃扎尼和帕唑帕尼对甲状腺癌细胞和血管内皮细胞的增殖均有显著的抑制效应,其作用是籍细胞周期休止作用而实现,但在两种细胞所诱发的细胞周期休止时相不同。
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