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金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,简称金葡菌)及肠毒素B(SEB)对海产品的严重污染一直困扰着海产品加工企业。本研究建立S.aureus及SEB免疫磁快速检测法,并评价两种制剂(芽孢杆菌抗菌肽和蛹虫草制剂)控制效果。具体包括三方面内容：化学键法制备免疫磁珠(IMB)。人IgG与磁珠偶联制备金葡菌免疫磁珠(IMBS.aureus); SEB标准品免疫家兔制备SEB抗体(效价为1：16)与磁珠偶联制备SEB免疫磁珠(IMBSEB)；两种IMB通过优化活化剂浓度(均为5mg/mL)、磁珠对抗体的偶联时间(24h和27h)、饱和吸附量(分别为293.27μg和318.56μg)来提高偶联率；根据免疫磁分离技术原理,结合常规细菌计数法建立IMBS.aureus快速检测法,结合间接竞争ELISA建立IMBSEB快速检测法(IMBSEB-ELISA)。IMBS.aureus快速检测法：通过优化抗体加入量(结合人IgG250μg)、IMBS.aureus对金葡菌孵育温度(37℃)、时间(60min)获得最大捕捉率,确定最低检测限为26cfu/10mL,准确度为92.81%,变异系数均小于15%。与国标法相比,IMBS.aureus法在虾肉中的应用具有高灵敏度,高效率(26.5h)的特点；IMBSEB-ELISA快速检测法：通过优化IMBSEB对SEB孵育时间(75min)获得最高捕捉量,优化最佳检测条件(包被浓度0.625μg/mL,抗体稀释度1：3000,碳酸盐缓冲液于4℃包被20h,BSA为封阻液,竞争抗原和抗体比例为7：3),明确检测范围(5-500ng/mL)和IC50(31.04ng/mL),确定其交叉反应<0.01%,最高阻断率为71.92%,最低检测限为3.99ng/mL,最低定量限为5ng/10mL,平均回收率为95.13%,变异系数均小于15%;IMBSEB-ELISA在虾肉中的应用具有高灵敏度的特点,准确性(平均回收率为101.66%)和精确性(变异系数为12.06%)均良好。两种制剂在S.aureus不同生长时期加入,利用两种免疫磁法检测菌及毒素含量变化。结果表明,芽孢杆菌抗菌肽和蛹虫草制剂MIC值分别为0.675mg/mL和25mg/mL。两种制剂均可有效控制金葡菌前20h的生长,芽孢杆菌抗菌肽可控制毒素含量；蛹虫草制剂在低菌浓度时可控制毒素含量。综上所述,免疫磁快速检测法为食源性致病菌及毒素的痕量检测提供了新的研究思路,为有效评价生物制剂对海产品的绿色安全控制提供了保障。