bFGF-PLGA缓释微球促进兔静脉皮瓣成活的实验研究

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目的应用W/O/W复乳溶剂蒸发法制备碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(Polylactic-co-glycolic acid,bFGF-PLGA)缓释微球,考察其对新西兰大白兔静脉皮瓣成活的影响。方法本文首先建立了BCA法测定缓释微球中牛血清白蛋白( BSA )含量,以及ELISA法测定bFGF-PLGA缓释微球模拟体外释放bFGF的含量,研究了以BSA作为模型药物制备注射用PLGA含药微球,并应用正交设计试验进一步优化bFGF微球的制备工艺,采用优化处方制备bFGF-PLGA微球,并考察其外观形态和粒径分布,检测其载药量和包封率,研究其体外释药的性质;以新西兰大白兔为实验模型制作侧腹壁静脉皮瓣,并术前5天分别皮内注入bFGF-PLGA(Ⅰ组),bFGF+空微球悬浊液组(Ⅱ组)和生理盐水(Ⅲ组)。术后,①计算术后7天皮瓣的成活面积;②取兔皮肤标本行CD34+免疫组化染色,检测CD34+表达情况及平均血管数。结果所制微球表面光滑圆整,球体均匀度好,无黏连现象。微球粒径的98%分布在12.50~43.49μm之间,平均粒径为26.93μm,径距0.611±6.60。载药量为[(23.11±0.44)×10-3]%,包封率为(86.51±0.83) %。突释期内微球的体外释放度为27.78% , 30d后体外累积释放度高达81.56% ,微球的体外释药规律符合Higuichi方程( r =0.997)。缓释微球组、空白微球组和生理盐水组术后7天的皮瓣平均面积分别为72.03±1.81、51.03±1.77、50.49±2.36%( P < 0.05) ,平均血管数目分别为34.01±2.30、23.81±3.03、22.56±2.26个/cm2 ( P < 0.05)。结论1.所制备的bFGF-PLGA缓释微球表征良好,载药量和包封率高;微球通过较长时间地持续释放活性bFGF。2.术前5天局部皮下注射bFGF-PLGA缓释微球持续释放bFGF,有效促进新生血管的形成,增加皮瓣的血运,提高缺缺血皮瓣的成活面积,是一种简单有效的细胞因子治疗方法。
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