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妥曲珠利(Toltrazuril),又名甲苯三嗪酮,属于广谱抗球虫药三嗪酮类衍生物的一种,对巨型、布氏和柔嫩等6种艾美尔球虫都有较强的杀灭作用,广泛用于家禽和哺乳动物球虫病的防治。妥曲珠利剂型在市场上十分单一,只有拜尔公司生产的妥曲珠利溶液剂一种商品,且含量较低为2.5%。由于妥曲珠利在水中溶解性很差(25℃下溶解度为0.41μg/mL),且稳定性低,易发生沉淀和变色,综上所述寻找一种水溶性高和/或生物相容性较好的载体材料并便于工业化生产一直是抗寄生虫药领域研究的热点。包合物是一类有机晶体。其包含两种结构单元:一种是能够将其他化合物捕获在其结构骨架的空腔中的化合物,即主体分子;另一种是被捕获在空腔中的化合物,即客体分子。β-环糊精及其衍生物由于具有大小适宜的空腔结构作为新型包合辅料在医药行业的应用日渐增多,这些辅料可以增加药物在水中的溶解度,能减少药物毒副作用,掩盖药物不良气味,具有一定程度的控释作用。SBE-β-CD(磺丁基醚-β-环糊精)具有高度水溶性,是由Cydex公司在美国在1990年开发的β-CD衍生物。与β-CD相比,SBE-β-CD具有更好的生物相容性且更易与药物分子结合形成非共价键,因此在药用赋形剂方面具有广阔的前景。本研究为改善妥曲珠利的溶解性能,以妥曲珠利为模型药物,制备了Tol/SBE-β-CD包合物,并对该包合物进行物理表征,最后以市售妥曲珠利溶液为参考,深入研究了妥曲珠利包合物在体内肉鸡的药代动力学。1、建立了妥曲珠利体内外含量测定的方法:即紫外分光光度法,建立标准曲线方程为A=0.0481C+0.0249(R2=0.9995)。方法可用于体外样品的含量测定。2、通过相溶解度探讨辅料SBE-β-CD对Tol的增溶作用并得到表观稳定常数,计算热力学参数,推测产生包合作用的可能性及包合产物的包合比,结果表明SBE-β-CD对妥曲珠利有明显增溶作用,且在35℃的碱性条件下表观稳定常数最大,相溶解度曲线呈A_L型,SBE-β-CD与药物形成1:1包合物,原药及辅料具有包合潜力。3、以包封率和载药量为综合评价指标(d),通过反应温度(A)、主客比(B)、pH值(C)和溶剂浓度(D)进行4因素3水平响应面法优化设计,最优处方和工艺为:在41.3℃条件下,精密称取环糊精与妥曲珠利(主:客=3.1:1)环糊精溶解在18.6 mL pH=9.9的磷酸缓冲液中,妥曲珠利溶解在8 mL甲醇中,在400 r/min磁力搅拌下反应3h,40℃旋转蒸发至10 mL,0.45μm滤膜过滤,得包合物溶液。为该不稳定体系长期保存,本实验将包合物溶液制成冻干粉剂,并优化冻干工艺,最终得到冻干工艺为:不加保护剂,-20℃预冻3 h,-79℃续冻12 h,最后置于-50℃条件下冷冻干燥20 h,程序升温至30℃(4 h)得到包合物冻干粉。4、冻干粉妥曲珠利含量为5.51±0.71%,包合物冻干粉在37℃的饱和溶解度为37409.27μg/mL,原药在37℃的饱和溶解度为0.631μg/mL,增溶了59285倍。红外光谱扫描(IR),热分析(DSC),X-射线衍射(XRD)和扫描电镜(SEM)结果显示冻干粉中妥曲珠利晶体结构消失新的包合物形成,核磁共振(1H-NMR)表明包合物的包合轨迹是妥曲珠利主药从环糊精大端口进入环糊精空腔。加速试验表明妥曲珠利包合物冻干粉需干燥密封保存。5、以肉鸡为模型动物,比较了唯一商品化妥曲珠利溶液剂(2.5%)与本包合物冻干粉中妥曲珠利的药代动力学,两种制剂的药动学数据结果表明妥曲珠利在肉鸡体内的药动学过程符合二室模型,制得的妥曲珠利包合物冻干粉,其饱和溶解度远大于唯一市售商品妥曲珠利溶液剂(百球清2.5%),在肉鸡体内吸收速率快,消除半衰期长,平均滞留时间长,药时曲线下面积大,其相对妥曲珠利溶液剂生物利用度显著提高,妥曲珠利包合物冻干粉有潜力作为妥曲珠利新剂型药物进一步开发。本研究不仅丰富了抗球虫药妥曲珠利剂型,也为磺丁基醚-β-环糊精作为增溶辅料进一步开发提供了参考。