粘质沙雷氏菌(S.marcescens)能够分泌一种非特异性的磷脂酶A2,磷脂酶A2主要靠Ca2+在体内分布。可分为分泌型(PLA2-Ⅰ和PLA2-Ⅱ)和胞质型(PLA2-Ⅲ和PLA2-Ⅳ)两种。本文从粘质沙雷氏菌中首次成功克隆出磷脂酶A2基因(p1A2),与pUCm-T载体连接,构建克隆载体pUCm-T-plA2。测序正确后,构建表达载体pET-15b-plA2并测序。将重组表达质粒pET-15b-plA2,转化到BL21(DE3),IPTG诱导表达,对表达条件进行了优化。经SDS-PAGE电泳鉴定,分子质量约为27KD,主要以包涵体形式存在。优化表达条件,确定最优条件为：pH6.5,37℃培养,转接量1：60,IPTG终浓度0.4mM,诱导6h,采用Ni纯化柱。对纯化后的样品进行了活性测定,其酶比活为137U/mg。分别以大豆卵磷脂和动物卵磷脂作为底物测定重组磷脂酶的Km值分别为：0.059mM和0.124mM,确定重组磷脂酶的最适底物为大豆卵磷脂。对不同底物浓度、PH、缓冲液离子强度的重组磷脂酶的活性进行了分析,确定底物浓度7%,PH6.0,缓冲液离子强度30Mm酶活最大.。同时利用重组酶进行了大豆油油脱胶的应用,实验表明当脱胶时间3h,酶用量15μL/Kg,脱胶温度40℃时脱胶效果最佳,本文研制的磷脂酶A2对于酶法脱胶大规模应用打下基础,成本低,克服了化工法脱胶产生的污染,脱胶过程是利用磷脂酶水解脂肪酸链生成溶血磷脂,溶血磷脂具有很好的水化性,水化的方法可以将它除去。