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土壤微生物是土壤生态系统的重要组成成分,又是土壤肥力的重要评价指标之一。氮沉降影响土壤微生物生长和繁殖,使其结构和功能发生改变,从而影响土壤物质循环和能量流动。本研究选取荷木(Schima superba)、马尾松(Pinus massoniana)、马占相思(Acacia mangium)、海南红豆(Ormosia pinnata)为研究对象,采用两种施氮方式(土壤表层施氮、叶面施氮),室内模拟不同浓度氮沉降(5.6 g N m-2a-1、15.6 g N m-2a-1、 20.6 g N m-2a-1),运用磷脂脂肪酸技术(PLFAs)和变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术研究氮沉降对土壤微生物多样性的影响。结果表明：1)氮沉降能够改变土壤理化环境。随着施氮水平的增加,土壤pH逐渐降低,土壤有机质含量逐渐增加,但是叶面施氮方式表现不明显。2)施氮方式、氮水平、树种和采样时间均可影响土壤微生物量。土壤表层施氮对土壤微生物量影响较大,但施氮方式对土壤微生物量影响未见显著差异；土壤表层施氮条件下,微生物量随氮沉降水平增加逐渐减少,尤其是细菌和放线菌,叶面施氮对于氮沉降水平响应不明显；土壤表层施氮方式下,土壤微生物量树种间差异较大,固氮树种(马占相思与海南红豆)土壤微生物量较高；土壤微生物量10月高于4月；真菌与细菌比值(F/B)受树种和采样时间显著影响,施氮水平和施氮方式对其影响不大。3)施氮方式、氮水平、树种和采样时间也影响土壤微生物群落结构。土壤表层施氮土壤微生物群落对氮沉降的响应较大,叶面施氮响应不明显；革兰氏阴性菌(G-) (18:1w9c,16:lw5c,18:1w7c,16:1w7c)主要出现在对照处理中,革兰氏阳性菌(G+) (a17:0,i17:0,i16:0)和G-(15：0,i16：0)主要分布在高氮沉降土壤中；树种间土壤微生物群落结构存在差异,土壤表层施氮方式尤为明显。G-相对含量马占相思较高,真菌相对含量马占相思和海南红豆较高,放线菌相对含量马尾松较高；采样时间对土壤微生物群落影响,土壤表层施氮影响较大,叶面施氮较小。4)氮沉降增加可改变了土壤细菌群落多样性,高氮能够提高土壤细菌多样性,施氮方式对土壤细菌群落也有影响。马尾松土壤细菌群落多样性随着氮水平的增加先减少后增加,优势类群为Acidobacteria_Gpl、Gammaproteobacteria和Alphaproteobacteria,荷木高氮处理下土壤细菌群落多样性增加,优势类群为Acidobacteria_Gpl;不同施氮方式对马尾松和荷木土壤细菌群落有影响,且荷木土壤细菌群落多样性叶面施氮略高于土壤表层施氮。5)采样时间和树种对土壤细菌群落有影响。马尾松细菌群落多样性10月高于4月；荷木细菌群落多样性较马尾松丰富。6)土壤微生物群落变化与土壤pH、含水量和N03.-N含量显著相关；马尾松土壤细菌群落变化主要受土壤pH影响,荷木土壤细菌群落多样性变化主要受土壤pH、全氮和NH4+-N影响。