产有机磷农药降解酶菌株的筛选及酶学性质研究

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本论文以受农药污染的土壤为实验材料,以敌敌畏为唯一碳源,经过富集培养、驯化、分离和纯化,筛选出七株产胞内有机磷农药降解酶的菌株,其中编号为OPD7的菌株的酶活力最高。对OPD7菌株的发酵产酶条件进行研究,得到的最佳培养基配方为:1.5%葡萄糖,1%蛋白胨,0.2%MgSO4·7H2O,0.5%KH2PO4,0.5%Na2HPO4,pH 7.0;最佳产酶条件为:接种量1%,培养温度37℃,摇床转速180rpm,摇瓶装液量100mL(250mL三角瓶)。在此优化条件下培养24h,该菌产生的有机磷农药降解酶酶活力为238U/ml,是未优化前的1.2倍。对OPD7菌株所产的有机磷农药降解酶的酶学性质进行了研究,结果表明:该酶的酶促反应的最适温度为42℃,最适pH值为7.0,pH稳定范围为6-8,在低于47℃时稳定;Mg2+、Ba2+、Mn2+对该酶有激活作用,Zn2+、Cu2+则有较强的抑制作用,对有机磷农药降解酶的专一性研究表明,OPD7菌株所产的酶不仅能降解敌敌畏,还能降解乐果、氧化乐果、乙酰甲胺磷、甲胺磷。蔬菜、瓜果类食品,由于虫害多,经常超量施药,造成农药残留超标现象严重,用本研究所获得的有机磷农药降解酶来作用于受有机磷农药污染的蔬菜,只需20分钟即可分解蔬菜表面98%以上的有机磷农药残留。
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