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目的:肝纤维化是各种肝脏慢性损伤因子持续刺激下,所致的病理性改变。肝纤维化是可逆的,但不控制将有可能进一步发展为肝硬化和肝癌。目前肝纤维化的防治尚无特定药物,故寻找有效的抗肝纤维化药物成为国内外制药公司的研究热点。龙虎人丹（Longhu Rendan,LHRD）作为一个应用几十年的中成药,现主要用止吐防暑等,而其他方面的作用研究未见报道,本实验将其应用于治疗肝纤维化的研究,以期寻找特异的抗肝纤维化的药物。方法:1.实验动物、分组及造模:四氯化碳（CCl4）模型:SPF级雄性C57BL/6小鼠30只,随机均分为3组:溶剂对照组（Oil）、模型组（CCl4）及龙虎人丹给药组（LHRD）。CCl4组和LHRD组分别腹腔注射CCl4构建慢性肝损伤及纤维化模型（每组2次,持续6周）。在此期间,LHRD组每天灌胃给予LHRD（100mg/kg）直到实验结束。胆管结扎（BDL）模型:昆明小鼠随机均分为3组:假手术组（Sham）、模型组（BDL）、龙虎人丹给药组（LHRD）。BDL组和LHRD组均采用双侧胆管结扎处理,持续15天。LHRD组在BDL前先灌胃预给药2周,BDL后,继续给药治疗直到实验结束。Sham组只开腔暴露胆管,不予结扎。2.取材及样本处理:在动物实验结束后24h,收集小鼠血样和肝脏,进行后续生化病理及分子生物学实验。结果:1.血清学指标结果显示,与对照组比较,无论CCl4组或BDL的ALT和AST均显著升高,而两种模型的LHRD组,相对于模型组,ALT和AST均明显下调,说明龙虎人丹可有效对抗两种不同模型所造成的肝损伤。2.HE和天狼猩红结果显示:LHRD组相较模型组,其肝脏的细胞坏死和炎症细胞浸润明显减少,模型组胶原纤维围绕中央静脉形成假小叶的结果,而LHRD组假小叶结果已近乎消失,汇管间胶原纤维桥联明显改善。通过IHC和western blot检测星状细胞活化标志物α-SMA的表达情况,结果显示LHRD组α-SMA的表达明显较模型组有所下调,荧光定量PCR检测发现,龙虎人丹可明显减少肝星状细胞活化与促纤维化因子的表达。上述结果说明龙虎人丹具有很好的抗肝纤维化作用。3.通过免疫组化检测肝脏巨噬细胞的标志物CD68表达发现,对比模型组,LHRD组CD68的表达明显减少,并且龙虎人丹可以明显抑制肝纤维化小鼠NFκB p65的磷酸化,减轻小鼠炎症抑制肝纤维化的发生发展。4.通过检测ROS及其上游NOX4和4-HNE的表达量,对比模型组,LHRD组ROS、NOX4、4-HNE的量明显减少。结论:LHRD可显著改善小鼠肝损伤及纤维化程度,其分子机制可能与LHRD抑制肝纤维化过程中的炎症和氧化应激发生相关。