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目的:观察单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)模型大鼠细胞炎性坏死标志物NOD样受体3(NOD-like receptor 3,NLRP3);半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteine-aspartic acid protease 1,Caspase-1);白细胞介素1β(Interleukine-1 beta,IL-1β)的表达,检测与其相关的Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、核转录因子kappa B(Nuclear factorκB,NF-κB)及醛固酮效应介质血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(Serum and glucocorticoid induced kinase-1,SGK-1)的改变,探讨中药益气活血解毒方拮抗UUO大鼠肾脏细胞炎性坏死的作用及相关机制,为此方的临床应用提供实验依据。方法:选取清洁级雄性Wistar大鼠48只,体重(180±20)g,适应性喂养1周。按随机分组原则,分成假手术组(Sham group)、UUO组(UUO group)、依普利酮组(EPL group)和益气活血解毒中药组(ZY group),每组12只。造模方法如下:10%水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射麻醉,腹部左侧行切口打开腹腔,游离左侧输尿管,上下侧结扎,中间离断,关闭腹腔。Sham组仅游离输尿管但不结扎离断。造模后,EPL组以100mg/kg·d掺入饲料喂养,ZY组以13.5g/kg·d灌服中药,Sham组和UUO组予灌服等容量生理盐水,每日1次,共10天。10天后处死各组大鼠,摘取梗阻侧肾脏。一部分肾组织放置于-70℃冰箱保存以便提取蛋白,另一部分放置于4%多聚甲醛中固定以便病理检测。TUNEL检测炎性坏死细胞。Western Blot、免疫组化检测SGK-1、TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达。结果:1.各组大鼠一般情况比较Sham组大鼠一般状况良好,饮水、进食等方面无明显变化,肾重/体重(0.0030±0.0004)g。UUO组大鼠饮水量、进食量均减少,肾重/体重(0.0138±0.0030)g,较Sham组明显增加(P<0.01)。与UUO组比较,EPL组及ZY中药组大鼠一般情况略好,肾重/体重分别为(0.0080±0.0031)g、(0.0095±0.0041)g,均下降(P<0.05)。2.TUNEL检测细胞炎性坏死模型组TUNEL阳性率为(36.79±4.67)%,较Sham组的阳性率(2.69±1.01)%明显上升(P<0.01),而两治疗组TUNEL细胞阳性率分别为(22.35±3.26)%与(24.08±5.06)%,较模型组减少(P<0.05)。3.免疫组化法检测SGK-1、TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达检测SGK-1、TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β在Sham组仅有少量表达,模型组表达明显增强,SGK-1、NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β主要见于肾小管上皮细胞中,TLR4主要表达于肾小球系膜细胞及肾小管。EPL组及ZY组表达强度及表达范围均较模型组减弱。4.Western blot法检测SGK-1、TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β的蛋白表达检测肾组织内SGK-1、TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β的蛋白含量。结果显示UUO组大鼠肾组织内SGK-1、NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β的蛋白表达均较Sham组有明显的上调(P<0.05)。其中EPL组及ZY组蛋白表达较UUO组均有所下调(P<0.05)。而TLR4模型组蛋白表达量较Sham组增多(P<0.05),EPL组蛋白表达量下降明显,甚至低于Sham组,ZY组表达量则介于Sham组与模型组之间,各组差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.醛固酮可通过SGK-1/TLR4通路上调NF-κB,诱导NLRP3活化,进而介导Caspase-1依赖的细胞炎性坏死。2.依普利酮能够通过下调SGK-1、TLR4表达,减轻细胞炎性坏死。3.中药益气活血解毒方能抑制NLRP3炎性小体减轻Caspase-1依赖的细胞炎性坏死,其机制与下调SGK-1、TLR4有关。