三黄泻心汤是中医药经典方剂,始载于《金匾要略》,由大黄、黄连、黄芩三味药物组成,具有清热泻火、泻热消痞、畅通心下等症治作用功效。对泻心汤的现代药效研究报道较多,表明其具有保护胃粘膜,抗体外血栓,改善微循环,增强机体免疫,降低血脂等多种作用效果。本实验采用拆方研究的方法对泻心汤及其单味药物的主要活性成分的分离纯化进行了比较研究。通过比较乙醇回流法、微波辅助法和酸碱溶剂提取法的提取率,筛选提取率较好的方法,再采用正交设计实验对影响提取率的各因素进行优化,根据提取工艺优化结果提取各组药物有效成分;分别用沉淀法和大孔吸附树脂纯化法纯化各组药物提取液中的活性物质,去除杂质类成分,得到纯度较高的药物样品液。采用TLC和HPLC法对各样品液中的主要组成成分进行分析和鉴定。再测定各组药物样品液清除自由基的作用效果。实验结果表明:1.泻心汤的各有效成分采用乙醇回流法和碱水微波提取法的提取率最高,碱水提取液在纯化上不易被树脂吸附,因此采用乙醇回流法提取;各单味药物经比较后,乙醇回流提取的提取率均优于其它方法,如大黄中蒽醌类物质提取率达4.57%,黄连中的生物碱类物质的提取率达8.51%,黄芩中的黄酮类物质提取率达3.77%。2.各组提取液经沉淀法和四种不同极性的树脂纯化后,大孔吸附树脂柱层析法的效果优于传统的沉淀法,而四种大空树脂中非极性的D101树脂纯化效果较好,纯化得率均达到80%以上,部分药物成分纯度略低于聚酰胺树脂;其次是弱极性AB-8树脂纯化效果较好,D301树脂和聚酰胺树脂纯化后,有效成分吸附解吸得率太低,使纯化效果较差。3.各样品液经TLC和HPLC检测后,与标准样对照均含有多个有效组分,与资料基本相符合,但是各单方和复方相对应的物质含量有的差别较大,这与纯化过程相关,同时也与复方提取时的协同浸出作用有一定关系。复方和单位药物邻苯三酚法清除超氧阴离子自由的效果较好,黄连和泻心汤的清除率较高,黄连0.4mg生药/ml浓度的清除率达46.67%,泻心汤的IC50约为1.25mg生药/ml;水杨酸法测定对羟自由基的清除率效果比清除超氧阴离子的效果差,效果最好的黄连4mg生药/ml的浓度加入200μl清除率只有33.8%。综上,实验对泻心汤及其单味药物有效成分的提取和纯化及鉴定进行了较为系统的研究,得到效果较好的提取纯化工艺,并对各样品进行了清除自由基实验;对泻心汤药物的工业制备和生产提供了一定的理论依据和参考。