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目的食管癌是一种发病率高、死亡率高的恶性肿瘤,在世界范围内,其发病率位居第八位,而死亡率位居第六位。食管癌发生的具体分子机制尚不清楚,已经利用微阵列技术发现100多个基因参与食管癌的发生发展。泛素特异性肽酶22(USP22),是近年来发现的泛素特异性加工酶家族(UBPs)的新成员。USP22基因定位于人第17号染色体上,含有1578个碱基对,编码分子量约为60kDa的蛋白。USP22的氨基末端具有一个特殊的锌指基序(ZnF-UBP),通过此结构介导USP22分子与靶蛋白之间的相互作用。USP22表达于早期胚胎,但在正常成人组织中表达程度不同,适度表达于心脏和骨骼肌,而在肺和肝脏中弱表达。以往研究结果证实,USP22与多种肿瘤的发生发展有关,USP22可能通过胚胎前植入、调节细胞周期及端粒动态平衡、参与信号转导、激活转录等途径,参与肿瘤的发生及进展。1993年,Pencil等研究鼠乳腺癌细胞13762NF时,发现并分离出一种与肿瘤转移能力相关的基因,即MTA1基因。此后研究发现人MTA1基因定位于14号染色体,其cDNA含有2756个碱基对。MTA1蛋白是NuRD的一个亚单位,具有明显的亲水性,其氨基酸序列中含有多个激酶的磷酸化位点。大量研究表明MTA1通过细胞信号转导、重塑染色质结构等途径上调或下调某些肿瘤相关基因的表达,参与肿瘤的形成及进展。1983年,Scholzen T等人研究霍奇金淋巴瘤L428细胞系时发现一种核增殖抗原,以其校名被命名为Ki-67,Ki-67基因位于人10号染色体上。Ki-67蛋白与细胞增殖有关,可反映细胞的增殖活性。研究发现Ki-67蛋白与肿瘤的形成、发展及转移有关。目前,在食管癌中联合检测USP22, MTA1及Ki-67蛋白的表达尚未见报道,本研究通过探讨USP22,MTA1及Ki-67蛋白在人食管鳞癌组织中的表达,与肿瘤生物学行为的关系以及它们三者之间的相关性,可能为食管癌的早期诊断、生物学评估、分子靶向治疗等带来新的希望。材料与方法收集我院(郑州大学第一附属医院)于2011年1月至2011年12月接受手术切除的44例患者食管癌组织,癌旁组织(定义为距癌组织边缘3cm以内)及正常组织(距癌组织边缘3cm以外),这些患者术后均被病理所证实,且术前均未行放化疗、中药及靶向治疗等。这项研究包括27例男性,17例女性；患者的年龄为45-82岁之间,其中≤60岁的22例,>60岁的22例；无淋巴结转移(包括局部淋巴结及远处淋巴结)19例,有淋巴结转移25例；浸润全层(突破食管壁肌层至外膜)23例,未浸润全层(未突破食管壁肌层)21例；Ⅰ/Ⅰ-Ⅱ级(高及高中分化)15例,II级(中分化)15例,Ⅲ/Ⅱ-Ⅲ(低及中低分化)14例。采用SP免疫组织化学染色法进行试验,按免疫组化试验步骤结合各试剂说明书严格进行操作,用PBS液替代一抗作阴性对照,用已知的阳性乳腺癌切片作阳性对照。以SPSS17.0软件包进行数据处理,各组间率的比较使用χ2检验,相关分析使用Spearman检验,检验水平α=0.05。结果(1)USP22的阳性表达率：正常组织15.91%,癌旁组织36.36%,食管鳞癌组织68.18%,任意两组间比较,均具有统计学意义(P<0.05)；USP22蛋白阳性表达率与肿瘤浸润深度、组织学分级有关,而与有无淋巴结转移、年龄及性别无关。(2)MTA1的阳性表达率：正常组织6.82%,癌旁组织31.82%,食管鳞癌组织61.36%,任意两组间比较,均具有统计学意义(P<0.05):MTAl蛋白阳性表达率与有无淋巴结转移,肿瘤浸润深度及组织学分级有关系,而与患者的年龄和性别无关。(3)Ki-67的阳性表达率：正常组织11.36%,癌旁组织43.18%,食管鳞癌组织70.45%,任意两组间比较,均具有统计学意义(P<0.05)；Ki-67蛋白以胞核染色为主,阳性细胞绝大部分为基底细胞；Ki-67蛋白阳性表达率与有无淋巴结转移、肿瘤浸润深度及组织学分级有关,而与年龄和性别无关。(4)在食管鳞癌中,USP22与MTA1蛋白的表达呈正相关；USP22与Ki-67蛋白的表达也呈正相关；而MTA1与Ki-67蛋白的表达无相关性。结论(1)USP22蛋白在食管鳞癌中异常高表达,推测USP22蛋白可能参与了食管癌的发生发展。(2)MTA1蛋白与食管鳞癌的发生有关,可能促进肿瘤细胞的浸润及转移。(3)Ki-67蛋白与细胞增殖密切相关,Ki-67蛋白高表达可能是促使食管癌发生的机制之一,对评估肿瘤细胞的增殖状态、研究肿瘤生物学行为也具有重要意义。(4)在食管鳞癌中,MTA1异常高表达可能激活了USP22基因,促使USP22蛋白高表达；USP22与Ki-67两者可能通过某种机制相互作用,促进细胞增殖与肿瘤的形成。USP22,MTA1及Ki-67蛋白共同参与了食管癌的发生及发展,三者可作为食管癌潜在的分子标志物,联合检测可更准确地判断食管癌的生物学行为,对食管癌的早期诊断、分子靶向治疗具有推动作用。