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脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)作为一种致残率很高的中枢神经系统疾病,其治疗目前仍是医学领域一个棘手的问题。已有大量研究证实了单独的骨髓基质细胞(Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs)和嗅鞘细胞(Olfactory ensheathing cells,OECs)移植对SCI的修复具有促进作用,但由于它们自身特性的限制,单独移植后能成功再生的轴突数目较少、距离较短,而且功能恢复的程度也不令人满意。为此,本实验首次将BMSCs和OECs联合移植于大鼠全横断的脊髓断端处,利用BMSCs具有多向分化潜能,移植后能产生细胞的多样性,在脊髓损伤区的微环境中可进行分化而替代或补充损伤神经细胞的特点,和OECs具有促进损伤神经轴突再生并穿越胶质屏障和分泌神经营养因子改善局部微环境的特点,借助于细胞间的相互作用,取长补短,综合二者优势,以期从结构和功能上改善对SCI的修复,为SCI的治疗提供新的思路,找出更佳的SCI修复手段。查阅文献,目前国内外尚未发现此类报道,由于BMSCs具有来源丰富,取材方便,可自体移植,不涉及伦理道德和免疫排斥方面的问题,OECs也可从自身鼻粘膜固有层活体取材获取,如本研究获成功,将具有重要的理论意义和广阔的应用前景。 本实验分为以下四部分,主要内容和结果如下: 1.骨髓基质细胞的体外培养及鉴定: 采用贴壁筛选法对取自成年S-D大鼠股骨和胫骨的BMSCs进行分离培养,并用细胞免疫荧光方法对BMSCs进行鉴定,观察到经4~5次传代的BMSCs都表达间充质干细胞标记物Vimentin,空白对照未见免疫荧光着色,细胞纯度较高,可用于移植研究。