针刺对慢性瘙痒疾病5-HT9和EP临床观察及实验研究

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:t60720372f
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目的:构建组胺依赖性瘙痒及非组胺依赖性瘙痒的小鼠模型,评价小鼠行为学变化;针刺小鼠的选定穴位,评价针刺对两种不同瘙痒机制的疗效区别,检测小鼠血中5-羟色胺(5-HT)及内啡肽(EP)水平,探讨针刺对血5-HT和内啡肽(EP)的作用,以及延髓5-羟色胺及内啡肽的表达变化,探讨针刺对慢性瘙痒抑制作用的靶点,确证针刺效应对延髓5-HT能神经元具有抑制作用、对EP能神经元具有激活作用的假说;针刺治疗慢性瘙痒患者,观察患者的瘙痒程度变化,并检测患者治疗后的血中5-HT及β-内啡肽(β-EP)的含量,探讨针刺对慢性瘙痒的治疗机制。  方法:  (1)70只雄性SPF级小鼠随机分配为7组:空白组、生理盐水组(针刺组、非针刺组)、组胺组(针刺组、非针刺组)、氯喹组(针刺组、非针刺组),构建组胺依赖性及非组胺依赖性瘙痒模型,针刺组对小鼠进行针刺治疗,非针刺组小鼠不进行任何治疗,记录小鼠治疗前和治疗后每天的搔抓次数,ELLISA法检测小鼠血中5-HT及β-EP水平,免疫组化法检测延髓5-HT及内啡肽的表达变化;  (2)选取符合要求的老年瘙痒症及神经性皮炎患者共120名,随机平均分成4组:老年瘙痒症和神经性皮炎各分成对照组(枸地氯雷他定)和治疗组(针刺+枸地氯雷他定),给予对应的治疗,采取患者治疗后的静脉血,检测血中5-HT及β-EP水平。  结果:  (1)空白组与生理盐水(针刺和非针刺组)相比较,注射瘙痒试剂30分钟内小鼠搔抓频率并无显著改变,无统计学意义;与空白组、生理盐水组比较,组胺组(包含针刺组和非针刺组)注射瘙痒试剂30分钟内小鼠搔频率显著增加,有统计学意义;与空白组、生理盐水组比较,氯喹组(包含针刺组和非针刺组)注射瘙痒试剂30分钟内小鼠搔抓频率显著增加,有统计学意义;与组胺非针刺组比较,组胺针刺组在治疗后30分钟内小鼠搔抓频率显著减少,具有统计学意义;与氯喹非针刺组比较,氯喹针刺组在治疗后30分钟内小鼠搔抓频率显著减少,具有统计学意义;  (2)治疗后,组胺针刺组与氯喹针刺组的瘙痒频率对比,具有统计学差异;  (3)ELISA结果:在针灸疗程后,与空白组相比,生理盐水(包含针刺、分针刺)的血中5-HT、β-EP含量无统计学差异;与组胺非针刺组相较,组胺针刺组血5-HT、β-EP含量显著降低,有统计学差异;与氯喹非针刺组相较,氯喹针刺组血5-HT、β-EP含量显著降低,有统计学差异;与组胺针刺组相较,氯喹针刺组血5-HT、β-EP含量减少明显,有统计学差异;  (4)免疫荧光结果:根据免疫荧光特异性抗体定位延髓5-HT和内啡肽能神经元;  (5)Western-Blot结果:与组胺非针刺组相比,组胺针刺组5-HT蛋白明显降低,β-EP蛋白明显升高,氯喹针灸组与氯喹非针灸组相比,氯喹针刺组5-HT蛋白明显降低,β-EP蛋白明显升高;空白组和生理盐水组(包含针刺组)相较,无显著的统计学差异。  结论:  (1)成功构建了组胺瘙痒模型以及氯喹瘙痒模型;  (2)针刺治疗对氯喹性瘙痒的抑制作用显著优于对组胺性瘙痒的作用;  (3)针刺能降低小鼠血中5-HT和β-EP含量;  (4)针刺能够下调中枢5-HT能神经元,上调中枢内啡肽能神经元;  (5)临床观察中,针刺能明显缓解患者的瘙痒程度,对比两组患者治疗后的血中5-HT和内啡肽的含量,证明针刺能降低血中5-HT和β-内啡肽。
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