对羟基苯甲酸甲酯和丙酯混合对雌果蝇生长生殖及Ⅳ型胶原蛋白相关基因的影响

来源 :陕西师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:baotong1029
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对羟基苯甲酸酯类被认为是一种相对安全的防腐剂,广泛应用于食品、药品、化妆品等领域,其中对羟基苯甲酸甲酯(MP)和丙酯(PP)是化妆品中最常用的组合。目前研究主要集中在对羟基苯甲酸酯类的雌激素效应,忽略了皮肤是对羟基苯甲酸酯类摄入最多的途径,而胶原蛋白作为人体组织中含量最丰富的蛋白,研究对羟基苯甲酸酯类对胶原蛋白的影响有助于全方位评估对羟基苯甲酸酯类作为防腐剂的安全性。本研究以黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)Canton-S品系雌性果蝇为实验材料,以MP和PP按质量比1:1混合(MP+PP),从卵开始对亲代雌果蝇进行不同浓度组、不同天数的暴露,子代不做处理,设置对照组和低、中、高3个MP+PP 浓度组(300 mg·L-1、700mg·L-1、1000 mg·L-1),5 个暴露天数(5d、10 d、15 d、20 d、25 d),从生理水平和分子水平上分析MP+PP对亲代和子代雌果蝇发育周期和Ⅳ型胶原蛋白相关基因vkg、Cg25c、mmp1、mmp2、timp的影响,研究结果如下:(1)低浓度组300 mg·L-1 MP+PP对亲代果蝇蛹化率有促进作用,中浓度组700 mg·L-1和高浓度组1000 mg·L-1有降低作用,但与对照组相比差异均不显著;中浓度组和高浓度组MP+PP对子代果蝇的蛹化率均有显著降低作用,而低浓度组300 mg·L-1降低作用不显著。(2)MP+PP混合暴露对于果蝇的羽化率没有显著影响,中浓度组和高浓度组相比对照组的羽化率略有降低,亲代果蝇和子代果蝇羽化率变化趋势一致,不同暴露天数间也并没有显著差异。(3)对于亲代雌果蝇,总产卵量随着处理浓度的升高呈总体上升趋势,暴露时间增加总产卵量会随之下降;子代雌果蝇则总产卵量均高于亲代总产卵量,且各浓度组间均没有显著差异,暴露天数间也并没有显著差异,表明MP+PP混合对于子代生殖力的影响要远小于对亲代雌果蝇生殖力的影响。(4)MP+PP混合处理下,亲代雌果蝇卵巢中Ⅳ型胶原蛋白相关基因vkg和Cg25c相对表达量随浓度升高呈下降趋势,但随着暴露天数的增加,vkg基因15 d和25 d出现高表达量,mmp1和mmp2基因在低浓度组300 mg·L-1表达量最高,这与亲代雌果蝇在低浓度组蛹化率最高相一致;相比亲代雌果蝇,子代雌果蝇卵巢中vkg和Cg25c相对表达量均出现上升,vkg表现为暴露5 d和10 d的相对表达量上升,mmp1和mmp2在浓度组中显著低于对照组表达量,这与子代雌果蝇卵巢中vkg和Cg25c表达量高于亲代结果一致;timp的相对表达量在亲子代果蝇卵巢中均呈现出低浓度组表达量最低,而中浓度组表达量最高,与mmp1、mmp2基因的表达量趋势相反,但timp表达量在浓度和暴露天数间并没有明显规律,这可能是timp受到多重调控原因有关。本研究检测了 MP+PP混合不同浓度及暴露天数对雌果蝇细胞外基质主要成分Ⅳ型胶原蛋白相关基因vkg、Cg25c、mmp1、mmp2、timp表达的影响,初步探究MP+PP对果蝇亲子代发育周期及生殖力的影响以及Ⅳ型胶原蛋白相关基因表达趋势,实验数据为进一步研究对羟基苯甲酸酯类的毒理机制提供借鉴。
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