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食品安全问题近年来受到人们越来越多的重视,寻找快速简便的微生物检测方法显得尤为重要。本实验对比现有广泛应用的商品化测试片,采用覆膜-载体结构制备微生物测试片,通过基础培养基配方的改良、测试片材料的选择、以及测试片结构的优化,最终制备了菌落总数和大肠菌群测试片,并对测试片的性能进行了评价。通过对不同配方培养基的性能比较,最终确定了菌落总数测试片和大肠菌群测试片所用培养基的配方。菌落总数测试片优化后的培养基配方为:葡萄糖1.25g/L、吐温80 0.025g/L、胰蛋白胨6.25g/L、酵母粉1.25g/L;大肠菌群测试片优化后的培养基配方为:酵母粉3g/L、乳糖5g/L、氯化钠7g/L、磷酸氢二钾3.4g/L、磷酸二氢钾1g/L、蛋白胨15g/L。通过对不同测试片材料的性能验证、以及不同测试片结构的比较,最终确定了测试片的最佳制作方法:(1)根据优化结果配制培养基,加入显色剂,搅拌均匀,加入胶凝剂,同时人工搅拌或用磁力搅拌器搅拌培养基,使得胶凝剂能在培养液中混合均匀;(2)将上述复配含冷水可溶胶凝剂的培养基浸渍两种无纺布3min,使无纺布浸满培养基;0.45μm的尼龙滤膜浸渍上述不含胶凝剂的培养基;由下至上依次叠放浸渍了含冷水可溶胶培养基的银河牌薄层无纺布、厚层无纺布和滤膜,叠放完成后置于55℃烘箱干燥,干燥4-6h即得到载体结构;(3)将3mm厚的垫圈作为下层,载体结构作为中层,4.5mm厚度的垫圈作为上层,组合制得三层“夹心”结构,即为测试片主体结构;(4)将测试片主体结构粘合于有粘性的底板基材上,覆盖上厚度为0.6mm的PET覆盖片材,即完成测试片的制备;(5)按照上述方法制作的简易装置放入铝箔包装袋中。辐照灭菌,辐照剂量为15KGy。通过与国标方法比较,验证了所制备测试片的性能。结果显示,菌落总数测试片在接种实验菌种后,其检测时间为20h。在测试片精确度实验中,测试片平均符合度为103.56%,菌落检出率大于国标法。大肠菌群测试片在接种实验菌种后,其检测时间为24h。在测试片精确度实验中,测试片平均符合度为70.16%,菌落检出率小于国标法。但测试片的特异性良好,仅有大肠菌群能在测试片上生长并显色。