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结肠直肠癌（Colorectal carcinoma,CRC）是一种常见的恶性肿瘤,CRC目前是全球发病率最高的三种癌症之一,死亡率位列第二。在国内,近年来CRC的发病率迅速上升,并且呈年轻化趋势。CRC的早期诊断率偏低是影响其患者预后的重要因素之一,大约有20%的CRC患者在诊断时已经表现出癌转移。因此,针对CRC肿瘤转移机制的研究及靶向药物的开发将有助于改善未来对患者的临床治疗。Slit2是一种外分泌蛋白,与Roundabout1（Robo1）受体结合介导下游信号的激活,在神经轴突和神经元细胞迁移过程中发挥重要作用。然而,Slit2/Robo1信号在不同肿瘤中的表达和功能存在差异。在CRC肿瘤组织中,Slit2的表达情况并不一致。本实验室前期研究结果表明,Slit2/Robo1信号在CRC患者肿瘤组织中表达升高,并通过Hakai介导E-cadherin降解促进肿瘤的转移,同时通过激活Src从而活化Wnt/β-catenin信号通路促进肿瘤的发生。但有文献报道,在CRC肿瘤中当Slit2启动子发生异常甲基化时可使其表达减少。因此,明确Slit2的表达及Slit2/Robo1信号通路影响CRC肿瘤发生发展的机制将有助于开发CRC的临床靶向治疗药物。转化生长因子-β（TGF-β）通过与其受体结合蛋白Smads蛋白家族结合,调节细胞增殖、迁移和凋亡等多种生物学过程。大量研究表明,TGF-β/Smads信号可以调控上皮-间质转化（EMT）的发生,而EMT与肿瘤转移密切相关。转化生长因子-β（TGF-β）不仅可维持正常结肠细胞的生理功能,同时也可影响CRC的进程及其肿瘤转移。据报道,TGF-β/Smads信号在CRC中被激活,在肿瘤早期抑制肿瘤细胞增殖,在肿瘤发展后期促进肿瘤细胞生长及EMT的发生,进而促进肿瘤转移。本实验室前期研究发现,Slit2/Robo1信号可以激活TGF-β/Smads信号通路促进肝纤维化。然而,Slit2/Robo1信号在CRC中是否与TGF-β/Smads信号通路存在调控关系尚不清楚。本论文针对这一问题开展研究,利用生物信息学数据库分析、临床CRC患者血清、两种动物模型及两种CRC细胞株阐明Slit2在CRC中的表达,及Slit2/Robo1信号与TGF-β/Smads信号通路在CRC肿瘤生长和转移中的调控关系。本论文首先通过分析生物信息学数据库（MERAV）,确定Slit2和TGF-β1在CRC肿瘤组织中表达升高,且与肿瘤分期呈正相关;并通过对临床CRC病人血清Slit2含量进行ELISA检测,确定Slit2在CRC患者血清中表达升高;利用自发性肠道腺瘤ApcMin/+小鼠,检测不同病理进程中小鼠血清Slit2含量,发现肿瘤小鼠血清Slit2含量比背景鼠的高,且血清Slit2含量随病理进程发展而逐渐升高;然后利用ApcMin/+转基因小鼠模型和LoVo细胞尾静脉肺转移模型探究Slit2/Robo1信号在CRC肿瘤发生和转移中的作用,结果显示利用Slit2/Robo1信号特异性阻断抗体R5腹腔给药后,ApcMin/+小鼠肠道微腺瘤数目减少,病理进程减慢;LoVo细胞尾静脉肺转移模型中小鼠肺转移灶数目明显降低。体外实验结果表明,R5抗体特异性阻断Slit2/Robo1信号后LoVo（高恶度）和SW480（中恶度）细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低,并且R5处理后,两种CRC细胞中TGF-β1/Smad2/3信号通路蛋白表达显著下调。同时本文也发现,利用P144小分子抑制剂抑制TGF-β1/Smad2/3信号后,LoVo和SW480细胞迁移和侵袭能力也显著降低,但肿瘤细胞增殖能力不受影响。且R5抗体对LoVo细胞迁移和侵袭的抑制作用可以通过补充TGF-β1得到恢复。本论文通过研究,确定了在临床CRC患者血清和肿瘤组织中Slit2表达的升高;在CRC中激活Slit2/Robo1信号可促进肿瘤生长和转移;且其对肿瘤转移的促进作用一部分是通过激活TGF-β1/Smad2/3信号来发挥作用。另外,Slit2/Robo1信号特异性阻断抗体R5可以显著抑制CRC肿瘤生长和转移,有望开发成CRC临床靶向治疗药物。