论文部分内容阅读
近年来,有害赤潮的频繁爆发破坏了海洋生态平衡,严重影响了人类生产与生活。海洋赤潮的预防与控制是当前的世界性难题。绿色环保的生物防治法被认为是目前具有较好发展前景的赤潮防治方法之一。本文从深圳南澳东山码头采集赤潮水样,从中成功分离获得41个菌株,包括34株细菌,7株放线菌,所有菌株都利用16s rDNA鉴定了菌属。从中筛选出具有血红哈卡藻溶藻活性的菌株25株,1%体积比下杀藻活性达到90%以上的菌株3株。对其中一株Arenibacter sp.6A1进行溶藻活性物质分析,将其放大发酵后用乙酸乙酯萃取,最终分离纯化获得6个主成分化合物,分别为胸腺嘧啶（1）、环脯氨酸-酪氨酸-二肽（2）、尿嘧啶（3）、吡咯-2-羧酸（4）、对羟基苯甲酸（5）、邻氨基苯甲酸（6）;进一步将六个化合物及其衍生物对三种常见赤潮藻进行溶藻活性检测,发现吡咯-2-羧酸（4）对血红哈卡藻、塔玛亚历山大藻和卡盾藻都有具有较好的溶藻活性,EC50分别为30.4μg·mL-1、40.2μg·mL-1、57.8μg·mL-1;pH对吡咯-2-羧酸（4）的溶藻活性有较大的影响,一定范围内,pH降低可以提高吡咯-2-羧酸（4）的溶藻效率;对羟基苯甲酸（5）对塔玛亚历山大藻有较好的溶藻活性,其EC50为54.5μg·mL-1;邻氨基苯甲酸（6）及对羟基苯甲酸（5）在甲酯化后溶藻活性稍有增强。其他化合物在100μg·mL-1的终浓度下均未表现出明显活性。在光学显微镜与扫描电子显微镜下观察了吡咯-2-羧酸(50μg·mL-1)对三种赤潮藻的形态影响,发现加入吡咯-2-羧酸后,血红哈卡藻和海洋卡盾藻均出现膨胀变圆、游动变慢、破裂等变化,塔玛亚历山大藻在光学显微镜下形状未发生变化,仅表现为游动变慢或静止于底部,在扫描电子显微镜下可观察到静止的藻细胞外壳内陷、变皱,外壳表面出现许多小孔,且有细菌聚集于小孔附近。对Arenibacter sp.6A1溶藻活性物质的深入研究与分析为对其溶藻机理的研究奠定了较好的基础。