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目的随着经济的迅猛发展,我国已经成为酒类消费大国,而由此引发的一系列酒精性肝病已成为严重的公共卫生问题。由于酒精性肝病的治疗方法仍然有限,中草药被认为是重要的替代方法,开发具有保护酒精性肝损伤的中药类保健食品,具有重要的社会意义。本实验根据前期血清药理学实验确定红景天和党参配伍的最佳比例,通过正交试验优选出红景天和党参提取液喷雾干燥的最佳工艺条件,并测定其喷雾干燥前后活性成分及抗氧化损失率。通过白酒诱导的小鼠急性酒精性肝损伤模型,比较不同剂量的红景天和党参复方制剂保护肝脏的作用及其作用机制。为红景天和党参复方制剂保健功能的开发提供理论依据。方法1.采用70%乙醇混合提取红景天和党参。通过正交试验,优选其喷雾干燥的最佳工艺条件。2.采用HPLC法测定喷雾干燥后红景天和党参复方制剂中红景天苷和党参炔苷的含量及计算损失率,通过对DPPH自由基清除能力计算抗氧化损失率。3.体内实验,取小鼠80只,随机分空白组、模型组、阳性对照组、红景天组、党参组、红景天和党参复方制剂低、中、高剂量组,每组10只。根据前期的血清药理学实验和动物体内实验结果确定红景天和党参以lg·60kg-1(生药)和1.5g·60kg-1(生药)为人体每日最佳推荐剂量,以5倍、10倍和20倍为小鼠低、中、高剂量,即红景天中剂量为0.167·kg-1(生药),党参中剂量为0.25g·Kg-1(生药)。通过红景天和党参药物提取液得率计算出,红景天和党参复方制剂以0.0895g·kg-1、0.179g·kg-1、0.358g·kg-1(粉末)为小鼠低、中、高剂量。阳性药物选择凯西莱(50mg·kg-1)。空白组和模型组灌胃蒸馏水(O.1mL·10g-1),其余给药组灌胃相应药物(0.1mL·10g-1),每天1次,连续5天。末次给药30min后,除空白组灌胃等量蒸馏水,其余组一次性灌胃56度红星二锅头16mL·kg-1,禁食不禁水。禁食12h后称重,摘眼球取血取上清液待测,并根据试剂盒测定血清中AST和ALT水平。颈椎脱臼处死小鼠后,迅速取出肝脏,记录肝脏重量,计算肝脏系数,计算公式:肝脏系数=肝脏重量(mg)/小鼠体重(g)。称取适量肝组织,制备肝组织匀浆液,取上清液待测。并根据试剂盒测定肝匀浆中TG、GSH、SOD和MDA含量。结果1.正交试验结果表明:红景天和党参提取液喷雾干燥最佳工艺条件:进风温度160℃,提取液相对密度1.09,辅料添加量50%,进行喷雾干燥,计算粉末收率为28.95%,含水量 4.02%。2.有效成分含量测定结果表明:喷雾干燥前红景天苷含量为(3.400±0.015)mg·g-1,喷雾干燥后红景天苷含量为(3.209±0.019)mg·g-1,损失率为5.56%;喷雾干燥前红景天苷含量为(0.304±0.0016mg·g-1,喷雾干燥后红景天苷含量为(0.288±0.0016)mg·g-1,损失率为 5.26%。3.DPPH自由基清除实验结果表明:喷雾干燥前IC50值为(0.681±0.061)mg·mL-1,喷雾干燥后IC50值为(0.718±0.022)mg·mL-1,抗氧化损失率为5.43%。4.HPLC方法学考察结果表明:考察的有效成分分别为红景天苷和党参炔苷,精密度RSD分别为1.43%和1.46%;稳定性RSD分别为1.37%和1.61%.;重复性RSD分别为1.36%和1.36%;加样回收率RSD分别为1.79%和1.77%。5.拆方实验结果表明:各组指标与模型组相比,差异均有统计学意义。其中复方制剂中剂量组与党参组相比,复方制剂中剂量组能显著降低ALT水平(P<0.01);与红景天组相比,复方制剂中剂量组能显著降低MDA含量,差异有统计学意义(P<0.01)。6.最佳剂量筛选实验结果表明:模型组各指标与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);除复方制剂低剂量组AST水平与模型组无统计学差异,其余各给药组指标均与模型组均有统计学差异(P<0.05);与复方制剂低剂量组相比,复方制剂中剂量组能显著升高SOD含量,差异有统计学意义(P<0.05)。7.肝脏系数结果表明:各组间比较差异均无统计学意义。结论1.红景天和党参提取液喷雾干燥最佳工艺条件为:进风温度160℃,提取液相对密度1.09,辅料添加量50%。2.红景天和党参复方制剂中红景天苷含量为(3.209±0.019)mg·g-1,党参块苷含量为(0.288±0.0016)mg·g-1。3.红景天联合党参对小鼠急性酒精性肝损伤具有保护作用。最佳剂量为中剂量(0.186 g·kg-1)。