钛表面形貌对大鼠成骨细胞和人单核细胞生物学行为影响的实验研究

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目的:本课题主要研究钛金属表面形貌对大鼠成骨细胞增殖活性,对人单核细胞激活、粘附及细胞因子分泌表达的影响,从细胞和分子水平探讨材料表面因素和表面介导的其它因素对成骨细胞和单核细胞生物学行为的调控,为研究钛种植体-骨组织界面的相互作用机理以及钛种植体表面改性提供理论依据。 材料和方法:本研究分为三个部分。 1、应用机械磨光、酸蚀、喷砂、喷砂酸蚀(sandblasting and large-grits etching,SLA)的表面处理方式形成四种不同的钛片表面形貌,分别记为SiC组、SiC+F组、63号组、63+F组。用表面粗糙度仪检测钛试件表面粗糙度,以Ra值表征,扫描电子显微镜(SEM)观测钛试件表面形貌。 2、SD大鼠成骨细胞原代和传代培养及大鼠成骨细胞鉴定,在处理钛试件表面接种第四代大鼠成骨细胞,采用MTT比色法检测接种一周内细胞活力,绘制细胞吸光度-时间曲线,反映成骨细胞的增殖趋势。 3、健康成年人外周血单核细胞分离鉴定,并接种于处理后钛试件表面,MTT比色法检测和钛片共同培养1、3、5、7天的细胞活力;SEM观察共同培养48小时钛片表面单核细胞粘附情况;双抗夹心ELISA法检测共同培养6小时、24小时、72小时和7天时培养上清液中TNF-α
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