藏药剌柏和圆柏药材质量标准的提高研究

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藏药柏科刺柏属植物刺柏(Juniperus formosana Hayata)是中国特产植物之一,分布地区主要集中在我国西北等地区。藏药刺柏在《中华藏本草》中异名为“秀巴才尖”,其根、树干、种子、叶可提取芳香油。藏药刺柏的根茎的挥发油成分中具有香柏油烃、柏香脑,柏木酮、松油烃;叶油中含有柠萜和少量的杜松子香油烃等;种子的挥发油中含有乙酸异龙脑酯及莰烯等。柏脑可以加工为乙酸柏酯,作为香剂保留剂、同常用香精、调香原料等,它可以用于化妆品、同常生活用品的调香、食用的香精、增加食品的香味¨,还可作为光学玻璃的清洁剂、显微镜镜头的油浸剂等;刺柏植物中含有丰富的黄酮一类成分,可以泻火、解毒、利尿、祛湿;治疗肾炎、水肿、淋病、风湿疼痛、炭疽病、创伤出血,治疗肾“协同乌素”,“达日干”等病症。其树脂可以干黄水。减药柏科圆柏属(Sabina Mill.)植物主要的地区分布为中国的西北和西南的山区,耐寒冷和干旱。常见的藏药圆柏属植物有大果圆柏(Sabina tibetica Kom.)、密枝圆柏(Sabina convallium(Rehd.et Wils.)Cheng.W.T.Wang)、滇臧方枝柏(Sabina wallichiana (Hook.f.etThoms.) Kom.)、祁连山圆柏(Sabina przewaskii Kom.)等。藏药圆柏根据不同参考资料所叫异名各不相同,例如《中华藏本草》有记载西藏圆柏又称“秀同”,但是在《中国少数民族传统医学》一书中西藏圆柏又称为“秀巴哲武”等。其根及枝中含有树脂和挥发油。挥发油的主要成分中含有蒎烯和雪松醇;其心材中含有雪松醇、日本崖柏烯、百里香对苯二酚、香芹酚等;其叶中含有挥发油,主要组分为α-蒎烯及柠烯等。减药圆柏有祛风散寒、活血消肿、解毒利尿、防腐、祛湿的功效,内服可以治疗风寒感冒、肺痈、尿路感染等,外用可以治疗风湿性关节炎,荨麻疹等疾病。圆柏属植物的木材纹理细致,坚固不宜磨损,可以为盖房子、家其制作等提供原材料。刺柏和圆柏是西藏人民医药用药材之一,《中国药典》2010年版一部未对刺柏和圆柏药材进行质量控制,现有文献也只是对刺柏和圆柏的部分项进行鉴别,因此本文对其进行了质量标准提高研究。主要研究结果如下:1开展了藏药刺柏和圆柏的原植物调查:对我国藏药的主要产地进行基源调查。收集不同地方产的植物药材,采集植物标本。对甘肃甘南、天祝、肃南等地进行实际考察,采集标本。在榆中进行生态和品种采集。认为国内藏药刺柏和圆柏的植物来源复杂。主要来源于圆柏属植物中的祁连山圆柏、大果圆柏、密枝圆柏、叉子圆柏、塔枝圆柏。对减药刺柏和圆柏质量标准制定奠定基础。2 完成藏药刺柏和圆柏的性状及显微鉴别:对甘南刺柏和臧药圆柏属植物来源中的大果圆柏、密枝圆柏、祁连山圆柏、叉子圆柏、塔枝圆柏进行了外观性状和显微鉴别。对原藏药刺柏和圆柏生药特征进行补充和完善。3 完成减药刺柏和圆柏的薄层色谱法定性鉴别:对甘南刺柏和减药圆柏属植物中的大果圆柏、祁连山圆柏、叉子圆柏、密枝圆柏、塔枝圆柏研究比较了最佳薄层色谱鉴别条件,增加了藏药刺柏和圆柏薄层色谱鉴别,为标准提供了新的质量标准控制技术。4建立了高效液相色谱法同时测定对减药刺柏和圆柏药材中三种黄酮类组分的含量:样品用70%甲醇超声后,采用色谱柱CAPCELL PAK C18 (4.6mm×250mm,5μm),流动相为梯度洗脱(0.2%磷酸乙腈-0.2%磷酸水),流速1.0mL·min-I,检测波长360nm,柱温:40℃。在上述的方法条件下藏药剌柏和圆柏药材中3种黄酮类成分均在40min内达到基线分离。并进行方法学考察,芦丁浓度在0.0049~0.1464μg/mL、槲皮苷浓度在0.0094~0.2814μg/mL(R2=0.9997)、山奈酚浓度在0.0054~0.1620μg/mL(R2=0.9996)范围内呈良好的线性关系(R2=0.9998)。芦丁、槲皮苷、山奈酚的平均加样回收率分别为:100.12%(RSD2.55%)、96.35%(RSD0.72%)、96.13%(RSD0.49%)(n=6)。结果显示三种黄酮在40分钟达到基本的分离,该方法分析时削短、稳定性和准确度良好,可用于藏药圆柏和刺柏药材的质量控制。5 建立了紫外分光光度法对藏药刺柏和圆柏中总黄酮的含量进行测定比较:以超声法提取刺柏和圆柏植物中的总黄酮成分,取槲皮苷作为对照品,采用分光光度法,确定在波长500nm处测定刺柏和圆柏的总黄酮的含量。槲皮苷的浓度在0.002892mg/mL~0.020244mg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9997)。平均加样回收率分别为:99.46%,RSD为1.87%。该方法稳定性、重复性、精密度和加样回收率均可以达到定量分析方法学的考察要求,可用于减药圆柏和刺柏药材的质量控制。6挥发油成分分析:对甘南刺柏和藏药圆柏属植物中的祁连山圆柏进行挥发油提取和成分比较分析。首先利用药典方法提取挥发油的甲法提耳义甘南剌柏和祁连山圆柏的挥发油,再用GC-MS对祁连山圆柏和甘南刺柏两种臧药材的挥发油成分进行比较分析。发现甘南刺柏和祁连山圆柏的挥发油成分差异较大,为以后研究藏药刺柏属和圆柏属植物提出了问题。本实验围绕藏药刺柏和圆柏标准提高进行了系统的研究,增加了薄层色谱、含量测定质量控制指标,研究建立的方法准确、简便和可靠,并对藏药刺柏和圆柏的现有质量标准研究进行整合和提高,提供了藏药刺柏和圆柏属药材的质量标准控制的理论依据。
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