【摘 要】
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目的:采用实时荧光定量PCR的方法检测miRNA-185在肾透明细胞癌组织与癌旁正常肾组织中的表达水平,并结合肾癌的组织学分级分析其表达水平间的差异及其意义,从而为进一步研究
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目的:采用实时荧光定量PCR的方法检测miRNA-185在肾透明细胞癌组织与癌旁正常肾组织中的表达水平,并结合肾癌的组织学分级分析其表达水平间的差异及其意义,从而为进一步研究其功能及作用机制做准备。方法:提取25例行手术治疗的肾透明细胞癌患者的肾癌组织和癌旁正常组织(距离肿瘤边缘>5cm)中的microRNAs,RT-PCR后用电泳初步检测所得的PCR产物,证明相应的实验条件和所设计的引物是否符合实验要求,后采用Real-time PCR的方法定量分析miRNA-185在肾癌组织及癌旁正常组织中的表达情况,结合肾癌的组织学分级进行统计分析,探讨其表达水平间的差异及其意义。结果:电泳结果显示,miRNA-185呈单一条带,其所处的位置及其在正常组织和癌组织中的表达情况符合前期的预计。Real-time PCR结果显示,miRNA-185在肾透明细胞癌组织中呈高表达(较癌旁正常组织平均升高4.07倍),其差异有统计学意义(P<0.01)。25例标本中有19例肾癌标本中miRNA-185的表达明显高于其在癌旁正常组织中的表达,仅有6例肾癌标本中miRNA-185的表达低于其在癌旁正常组织中的表达。G1期的4例肾癌标本均较相应的癌旁正常组织呈现低表达,高表达的则离散分布在G2和G3期,相关性分析结果显示,miRNA-185在肾透明细胞癌组织中的表达水平与肾癌组织学分级呈正相关(r=0.67,P<0.01)。结论:miRNA-185在肾透明细胞癌组织中呈显著高表达,其表达高低与肾透明细胞癌的组织学分级初步表现出相关性,呈现了相对表达量随组织学分级增高而增高的趋势。提示miRNA-185与肾透明细胞癌的发生与演进有关,其在肾透明细胞癌中很可能具有癌基因作用,并且有望成为指导肾透明细胞癌早期诊断、治疗、预后评估的新靶点。
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