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为了研究不同周期Sf9细胞线粒体琥珀酸脱氢酶酶活的差异,首先使用TdR(胸腺嘧啶核苷)双阻断法将Sf9细胞同步化于G1/S期,恢复生长分别得到S、G2/M、G1期的细胞,然后利用MTT法检测不同细胞周期的Sf9细胞琥珀酸脱氢酶酶活,发现处于G1期的细胞酶活比处于S期的细胞酶活要大,而处于S期的细胞酶活又要大于处于G2/M期的细胞酶活。其次跟踪细胞成长,在不同的时间点采样,用流式细胞仪分析其细胞周期分布并通过MTT法检测琥珀酸脱氢酶酶活,发现接种后48 h的Sf9细胞酶活最大。此时与其他时刻相比细胞处于G1、S期所占的比例均最大,进一步说明琥珀酸脱氢酶酶活与细胞周期紧密相关。
昆虫细胞-杆状病毒表达系统由于具有强大的多角体基因启动子,近年已经发展成为高表达异源蛋白及生产重组病毒杀虫剂的强有力工具。已有的杆状病毒感染昆虫细胞的动力学模型主要考察了感染复数、感染时间的影响。感染时间直接关系到细胞感染过程中细胞群的周期分布,因此,研究细胞周期对感染动力学的影响比研究感染时间的影响更直接,更重要。本课题研究了在不同细胞周期的感染对杆状病毒感染动力学的影响。结果表明,在低感染复数下感染处于不同细胞周期的细胞会对芽生的时间和数量产生影响。