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雪菊是一种传统茶饮,在新疆等地有大量栽培,其学名为两色金鸡菊(Coreopsistinctoria Nutt.)。雪菊中的黄酮类物质能调节糖脂代谢紊乱,且在体外具有清除自由基的功效。黄酮类物质是自然界存在的一大类天然活性物质,有着低毒、多效的特点,故本课题以秀丽隐杆线虫(C.elegans)为实验对象,研究了雪菊中5种含量最高的黄酮类化合物的抗衰老功效,分别是马里苷、黄诺马苷、异奥卡宁、6,7,3’,4’-四羟基橙酮及槲皮素。研究结果如下:1.雪菊黄酮类化合物能延长秀丽线虫的寿命。通过比较喂食不同化合物后野生型秀丽线虫N2寿命的变化,判断雪菊是否能延缓N2的衰老。结果发现,和空白对照组相比,马里苷、黄诺马苷、异奥卡宁及6,7,3’,4’-四羟基橙酮处理后N2的生存曲线右移,且平均寿命和最大寿命均高于空白对照组,差异具有统计学意义。2.雪菊黄酮类化合物能增强秀丽线虫的抗急性氧化应激能力。用H202对5种化合物处理后的N2进行急性氧化应激处理,通过比较不同处理组N2的存活率,确定雪菊在生物体内是否具有抗氧化的功效。结果发现,经急性氧化应激处理后,喂食化合物的N2的存活率均大于空白对照组,说明这些化合物具有抗氧化的功效。再以表达DAF-16::GFP融合蛋白的转基因秀丽线虫为研究对象,通过统计氧化应激后,各处理组秀丽线虫体内DAF-16::GFP进入细胞核的细胞的相对比例,初步探究雪菊抗氧化活性是否和促进DAF-16向细胞核内转移有关。结果表明,与空白对照组相比,经化合物处理后秀丽线虫体内DAF-16入核率明显升高,说明这些化合物的抗氧化作用和促进氧化应激时DAF-16进入细胞核有关。3.雪菊黄酮类化合物能减少秀丽线虫肠道内的脂肪堆积。利用葡萄糖建立秀丽线虫肠道脂肪堆积模型;再利用Nile Red活体染色法对其肠道脂肪进行染色,通过荧光定量分析,确定这5种化合物是否具有降脂功效。结果发现,与空白对照组相比,喂食葡萄糖的秀丽线虫肠道的荧光强度较强,说明成功建立了秀丽线虫肠道脂肪堆积模型;与模型组相比,化合物处理后的N2体内荧光强度减弱,说明这些化合物具有降脂作用。再利用qRT-PCR、Western Blot等方法对马里苷处理后的秀丽线虫体内脂代谢相关基因及蛋白的表达量进行了检测,发现50 马里苷可显著降低FAT-7的表达,而在转录水平上对脂肪合成过程中相关的基因fat-7、sbp-l及脂肪分解过程中相关的基因nhr-49的表达量无影响,说明马里苷能通过减少FAT-7的表达起到降脂作用。综上,雪菊中的5种黄酮类化合物能延长秀丽线虫的寿命,并能通过促进DAF-16入核而增加秀丽线虫抗急性氧化应激能力;此外,马里苷能通过减少FAT-7的表达而减少秀丽线虫肠道内的脂肪含量。因此可以得出结论,两色金鸡菊有较好的抗衰老活性。