细胞大规模培养技术作为生产抗体药物的核心技术,由于表达水平和生产规模的限制严重的阻碍了蛋白类药物在我国的发展和应用。为此本文首先以表达单克隆抗体的中华仓鼠卵巢细胞为研究对象,对细胞的培养工艺进行开发,得到了产品表达高和产品质量好的细胞流加培养工艺,并建立了放大和缩小模型及策略,最终实现了稳定、可靠的单克隆抗体药物的生产。首先,对培养基进行筛选,结果表明Dynamis培养基细胞生长效果最好且最终产量为1.53 g/L。在此基础上,添加yeastolate水解物能够提高抗体表达量,最终抗体产量达到2.5 g/L。接着在2 L反应器上进行工艺的确认。结果显示2L反应器与摇瓶相比无显著的差异,表明该流加培养工艺能够稳定的放大至实验室规模的反应器中。其次,对2 L反应器和200 L反应器进行分析建立了规模放大和缩小的策略,将放大参数分为非体积相关的参数和体积相关的参数两大类。通过在2 L反应器和200 L反应器进行了放大和缩小的实施,结果表明细胞在生长、代谢、蛋白表达和蛋白质量方面基本一致。统计学的方法也证明了200 L反应器和2 L反应器是等效一致的。进一步,对培养过程中的六个关键工艺参数:温度、pH、溶氧、流加量、培养时间和接种密度进行响应面设计,考察培养参数对蛋白产量和质量的影响。通过计算和模拟的方法确定了工艺参数的操作范围。最终,通过在200L反应器上对设计空间进行了验证,结果表明在200L生产规模的反应器上能够持续可靠的生产出稳定的产品。本文基于质量源于设计(Quality by Design,以下简称QbD)理论建立和开发了产品表达量高、产品质量好的流加培养工艺,并得到了反应器设计空间。此外,本文对其他采用QbD理论进行哺乳动物细胞培养工艺开发和放大以及抗体工业化生产过程的开发,具有重要的借鉴意义。