目的:探讨酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测乙肝表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBs Ag)结果判定“灰区”设置的必要性、合理区间,及对HBs Ag灰区和单试剂反应性样本中和试验的确认情况。方法:选取蚌埠市中心血站2010年1月至2014年6月,ELISA法检测HBs Ag为灰区(0.7≤S/CO<1)和单试剂反应性样本共295例,其中灰区组136例(包括双试剂灰区10例和单试剂灰区126例),单试剂反应性组159例,采用HBs Ag中和试验进行确认,并用卡方检验的统计学方法对实验结果进行统计学分析。结果:136例灰区样本中HBs Ag中和确认试验检测出阳性样本10例,阳性率为7.35%,结果异常样本14例;159例单试剂反应性样本中HBs Ag中和试验确认阳性样本19例,阳性率为11.95%,结果异常样本16例,灰区与单试剂反应性样本的阳性率差异没有显著性;S/CO值在区间0.70~0.79、0.80~0.89、0.90~0.99的阳性率分别为3.92%、5.88%、14.71%,有逐渐升高的趋势,但三个区间的阳性率之间比较差异无统计学意义;双试剂灰区与单试剂灰区样本的阳性率分别为6.35%、20%,双试剂灰区的阳性率明显高于单试剂灰区阳性率,但差异无显著性。结论:对于HBs Ag检测结果为灰区和单试剂反应性标本,均存在一定的真阳性标本,应该引起高度重视,因此双试剂检测与灰区的设置对保障输血安全均是必要的。应结合自己实验室实际设置合适的灰区,最大限度地检出这些可疑标本,并进行确认实验,进一步减少HBs Ag漏检和误检率,以提高输血安全,同时确证试验对献血者归队策略有重要意义,可以减少献血者的流失。