本课题主要是对海藻糖合酶转化生产海藻糖进行研究，首先对发酵工程菌的破壁方法研究，使用超声波、溶菌酶和高压均质处理菌体后，释放酶活的结果显示，高压均质法破碎菌体时间短，细胞破碎完全，释放酶活效果最好。菌体细胞经破壁后，海藻糖合酶被释放出。然后以麦芽糖浆为底物进行酶转化实验。通过对转化条件的优化实验研究后，确定海藻糖合酶的最适反应pH为7.5；最适反应温度40℃；转化完全的最佳时间为6小时；底物麦芽糖的最佳浓度为30%，在此浓度下，海藻糖的转化率达到73.5%。对转化糖液的处理，主要是由于海藻糖和麦芽糖极难分离，同时转化时有部分葡萄糖的生成，决定将其中麦芽糖降解为葡萄糖，然后再进行分离。选择在pH=4.5、温度60℃和200U/g酶加量下，使用糖化酶处理8小时后，转化糖液中麦芽糖全部降解为葡萄糖，无残留，海藻糖保留值为99.90%。在分离前先对糖液进行脱色脱盐处理，使用活性炭对糖化液进行脱色，最佳脱色条件为：pH=5.0，温度75℃，活性炭添加量为2%（w/v），脱色时间60分钟。用001×7和201×7树脂以串联的方式，连续脱盐。经脱色脱盐后，海藻糖几乎没有损失。此时糖液中只有葡萄糖和海藻糖，可以直接进行下一步的色谱分离。通过大量的静态摇瓶筛选和单柱洗脱试验，从几种可能的树脂中筛选出分离效果最好的A216Ca2+型树脂。通过优化，得到单柱的最佳分离条件：纯净水洗脱，温度60℃，进样体积10mL，洗脱流速1mL/min时达到最大分离度R为0.56。通过对混合糖在模拟移动床系统中单柱评价实验，应用三角形理论，找到线性条件和非线性条件下的完全分离区。根据完全分离三角区的边界条件，得到SMB系统分离的理论操作参数。通过模拟移动床实际操作将理论参数不断优化，得最佳分离效果为：海藻糖纯度97.6%，其平均质量浓度为58.1g/L；葡萄糖纯度98.8%，其平均质量为71.2g/L。经过三个周期的循环稳定，计算可得海藻糖和葡萄糖的回收率分别为83.2%和79.2%。实现了海藻糖与葡萄糖的连续直接分离,说明模拟移动床完全可以应用到海藻糖的分离上，为工业化分离海藻糖研究提供一定的依据。对分离的海藻糖进行结晶实验，将海藻糖母液浓缩到60%时，加入3倍体积的95%乙醇，缓慢搅拌下结晶，可以得到大小均一、纯度为98.4%左右的海藻糖晶体，回收率为94.2%。