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目的: 探讨miR-16,B12和CD272在活动性肺结核(PTB)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达并分析其临床意义,并构建B12和CD272基因3’-UTR双荧光素酶报告质粒,验证miR-16对CD272和B12 mRNA3- UTR的靶向作用。 方法: 收集广东省东莞市第六人民医院2015年11月~2016年10月确诊为PTB的患者47例及健康志愿者(HV)50例,免疫磁珠分离 PBMC中 T细胞亚群(CD3+)、B细胞亚群(CD19+)和单核细胞(CD14+)。Real-time PCR法检测结核菌抗原刺激后外周血PBMC、T细胞、B细胞和单核细胞miR-16、CD272和B12 mRNA的表达。流式细胞术检测miR-16慢病毒转染后外周血PMBC中T细胞、B细胞和单核细胞CD272和 B12的表达。双荧光素酶基因报告系统验证miR-16对CD272和B12 mRNA3-UTR的靶向作用。 结果: PTB患者外周血PBMC中miR-16和B12 mRNA相对表达量显著高于HV志愿者、CD272 mRNA相对表达量显著低于HV志愿者(P<0.05)。痰阳(SS+)患者PBMC中 miR-16相对表达量显著高于痰阴(SS-)患者(P<0.05)。痰阳(SS+)患者PBMC中CD272 mRNA相对表达量显著低于痰阴(SS-)患者(P<0.05)。PTB患者PBMC中miR-16含量与B12 mRNA相对表达量显著负相关(r=-0.3698,P=0.0114)。miR-16在CD14+单核细胞中的相对表达量显著高于在CD3+T淋巴细胞中的表达量,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。CD19+B淋巴细胞CD272 mRNA相对表达量明显高于CD3+T淋巴细胞和CD14+单核细胞(P<0.05)。CD3+T淋巴细胞CD272 mRNA相对表达量明显高于CD14+单核细胞(P<0.05)。PTB患者外周血PBMC中CD3+T细胞、CD14+单核细胞和CD19+B细胞含量显著高于HV志愿者(P<0.05)。PTB患者B12+CD3+T细胞含量显著高于HV志愿者(P<0.05)。PTB患者B12+CD14+单核细胞,CD272+CD14+单核细胞和CD272+B12+CD14+单核细胞含量均显著低于HV志愿者(P均<0.05)。痰阳(SS+)患者B12+CD3+T细胞含量显著高于痰阴(SS-)患者(P<0.05)。痰阳(SS+)患者B12+CD14+单核细胞、CD272+CD14+单核细胞和CD272+B12+CD14+单核细胞含量均显著低于痰阴(SS-)患者(P<0.05)。BCG全菌裂解物刺激或miR-16慢病毒转染后,CD272+CD3+T细胞和B12+CD272+CD3+T细胞比例显著下降(P<0.05)。B12+CD3+T细胞比例在BCG全菌裂解物刺激显著上升,但miR-16慢病毒转染后却使B12+CD3+T细胞比例降低(P<0.05)。BCG全菌裂解物刺激后, CD272+CD14+单核细胞和 B12+CD272+CD14+单核细胞比例显著下降, B12+CD14+单核细胞比例显著上升(P<0.05)。miR-16慢病毒转染后B12+CD14+单核细胞比例降低(P<0.05)。双荧光素酶基因报告系统证实miR-16对靶向作用B12 mRNA3-UTR而不作用CD272 mRNA3-UTR。 结论: miR-16、B12和CD272异常表达与结核病发生密切相关, miR-16可能通过靶向调节B12表达参与结核免疫过程。